[发明专利]一种硒香菇多糖的提取分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种硒香菇多糖的提取分离纯化方法，利用稀碱提取香菇多糖，然后利用亚硒酸钠和香菇多糖在反应液中反应获得硒香菇多糖。其步骤是：S1、首先对香菇预处理；S2、碱溶性香菇多糖提取；S3、香菇多糖的制备；S4、采用乙醇沉淀法、Sevag法、盐酸法、三氯乙酸法将香菇多糖的分离纯化；S5、利用亚硒酸钠和香菇多糖在反应液中反应获得硒香菇多糖。本发明的硒香菇多糖的提取分离纯化方法，利用亚硒酸钠和香菇多糖在反应液中反应获得硒香菇多糖，通过优化香菇多糖的提取工艺，提高硒香菇多糖的获得率。

主权项

1.一种硒香菇多糖的提取分离纯化方法，其特征在于：包括如下步骤：/nS1、香菇预处理/n将香菇块烘干，粉碎机粉碎过40目筛，得香菇粉末。向香菇粉末中加入石油醚于60℃水浴中加热回流脱脂1h，离心收集残渣，重复脱脂三次，溶剂挥干后，加入80％乙醇磁力搅拌，以除去小分子醇溶物，离心收集残渣，依此过程重复三次，50℃干燥，得脱脂香菇粉末；/nS2、碱溶性香菇多糖提取/n取脱脂香菇粉末10g置于烧杯中，加入蒸馏水1000rpm磁力搅拌5min使其充分混匀，以1：50固液比例于80℃水浴中热水浸提25min，离心分离上清液，去除水溶性物质，收集残渣，以1：100固液比例加入0.5M氢氧化钠溶液，4℃冰浴中超声提取40min，离心得上清液Ⅰ；所得残渣依照上述方法重复提取一次得上清液Ⅱ，合并两次上清液，并用10％的醋酸溶液中和至pH＝6，用蒸馏水洗涤胶状沉淀反复脱盐后冷冻干燥得碱溶性香菇多糖粗品；/nS3、香菇多糖的制备/n称取3.00g碱溶性香菇多糖粗品置三口烧瓶中，加入50mL异丙醇和20mL20％NaOH的混合溶液，冰浴搅拌3h使其分散均匀；/n室温下，取12g一氯乙酸溶于50mL异丙醇中，再与20mL20％NaOH溶液相混合；通过常压滴液漏斗将混合液缓慢滴加入反应体系中，搅拌反应3h，将反应液升温至60℃继续搅拌30min；/n另取12g一氯乙酸，20mL20％NaOH溶液和50mL异丙醇相混合，加入60℃反应体系中继续反应1h，终止反应，冷却至室温，以1.0mol/L HCl溶液调节pH至7.0，旋蒸回收异丙醇，剩余反应液用再生纤维素透析袋流水透析3天，蒸馏水透析3天，旋转蒸发浓缩透析液，脱蛋白，4倍体积无水乙醇沉淀过夜，离心收集沉淀，经冷冻干燥得白色粉末状香菇多糖；/nS4、采用乙醇沉淀法、Sevag法、盐酸法、三氯乙酸法将香菇多糖的分离纯化；/nS5、利用亚硒酸钠和香菇多糖在反应液中反应获得硒香菇多糖。/n