[发明专利]一种ESO多因的制备方法在审
申请号: | 201910933942.8 | 申请日: | 2019-09-29 |
公开(公告)号: | CN110643570A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 朱灏 | 申请(专利权)人: | 华夏源(上海)生命科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12P21/00 |
代理公司: | 11427 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 陈娟 |
地址: | 201100 上海市闵行*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种ESO多因的制备方法,从低温储存容器中取出脐带间充质干细胞,让脐带间充质干细胞迅速解冻;将解冻后的脐带间充质干细胞转移至细胞培养皿中培养;接种针将培养皿内的细胞菌落均匀划分成六块,再将接种针至于酒精灯外焰灼烧,迅速将接种针插入一块细胞菌落,并迅速取出,每块菌落同上操作三次,直至划分的每块菌落预灼伤完毕;再执行第二次灼烧感染培养;并使用 | ||
搜索关键词: | 脐带间充质干细胞 制备 接种针 细胞菌落 菌落 解冻 培养皿 取出 酒精灯外焰灼烧 低温储存容器 超纯水系统 细胞培养皿 导电介质 转速离心 次灼烧 上清液 器皿 去除 感染 | ||
【主权项】:
1.一种ESO多因的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:/n步骤一、从低温储存容器中取出脐带间充质干细胞,并迅速将其至于36.5℃的水槽中晃动,让脐带间充质干细胞迅速解冻;/n步骤二、取无菌的10ml培养皿,并在培养皿中配置专属拥有FDA的MDF号无血清培养基,并将解冻后的脐带间充质干细胞转移至细胞培养皿中培养3天,并保持培养皿温度在36.5℃;/n步骤三、通过接种针将培养皿内的细胞菌落均匀划分成六块,再将接种针至于酒精灯外焰灼烧,直至接种针的针头灼烧10-15s,迅速将接种针插入一块细胞菌落,并迅速取出,每块菌落同上操作三次,直至划分的每块菌落预灼伤完毕;/n步骤四、将灼伤完成后的脐带间充质干细胞培养皿,保持温度在36.5℃继续培养30h,执行第二次灼烧感染培养;/n步骤五、将第二次培养后的脐带间充质干细胞转移至离心分离器皿中,并使用
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