[发明专利]用于体外抗原呈递、评估疫苗功效及生物制剂和药物的免疫毒性的组合物、试剂盒和方法

摘要

本发明描述了用于将抗原(肽、蛋白质)或编码抗原的核酸递送到专门的APC(PAPC)的组合物、测定、试剂盒、方法和平台，其用于评估疫苗(例如，对特定抗原的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答)或其它疗法或干预(基于细胞的疗法、辅助疗法等)的功效。所述组合物、试剂盒、测定和方法涉及与带电荷的(例如，带正电荷的)高度支化聚合的树状聚合物(例如，PAMAM和其它树状聚合物)的组合使用MHC靶向性、通用DR结合肽(例如，PADRE、HA)作为媒介物以将核酸、肽、生物制剂、药物、或多肽靶向递送到APC。

主权项

1.一种检测对疫苗的免疫应答的方法，该方法包括以下步骤：/na)制备或提供包含多个带电荷的高度支化聚合的树状聚合物的组合物，每个所述树状聚合物具有与其缀合的至少一种通用DR结合肽和至少一种肽或多肽抗原或编码所述至少一种抗原的核酸，其中所述至少一种通用DR结合肽和所述核酸或至少一种肽或多肽抗原与所述多个带电荷的高度支化聚合的树状聚合物的外部表面缀合，使得所述至少一种通用DR结合肽特异性结合专门的抗原呈递细胞(PAPC)，/n其中所述疫苗包含所述抗原；/nb)在对受试者接种疫苗前自所述受试者获得包含PAPC的第一样本；/nc)将所述第一样本分成所述第一样本的第一部分和所述第一样本的第二部分；/nd)在温育条件下使所述第一样本的第一部分与所述组合物接触，使得所述多个带电荷的高度支化聚合的树状聚合物被所述PAPC吸收，并且使得所述抗原由所述PAPC处理，并且由与MHC II类结合的所述PAPC呈递；/ne)清洗所述第一样本的第一部分和所述第一样本的第二部分；/nf)以两种或更多种的比率组合所述第一样本的第一部分和所述第一样本的第二部分，从而得到第一多个混合物；/ng)将所述第一多个混合物温育1个或多个小时；/nh)对所述多个混合物检查至少一种指示对所述疫苗的免疫应答的分子或标志物的存在，并测定所述至少一种分子或标志物的水平；/ni)在已经对所述受试者接种疫苗后自所述受试者获得包含PAPC的第二样本；/nj)将所述第二样本分成所述第二样本的第一部分和所述第二样本的第二部分；/nk)在温育条件下使所述第二样本的第一部分与所述组合物接触，使得所述多个带电荷的高度支化聚合的树状聚合物被所述第二样本的第一部分中的所述PAPC吸收，并且使得所述抗原由所述第二样本的第一部分中的所述PAPC处理，并且由所述第二样本的第一部分中与MHCII类结合的所述PAPC呈递；/nl)清洗所述第二样本的第一部分和所述第二样本的第二部分；/nm)以两种或更多种的比率组合所述第二样本的第一部分和所述第二样本的第二部分，从而得到第二多个混合物；/n将所述第一多个混合物温育1个或多个小时；/nn)对所述第二多个混合物检查所述至少一种分子或标志物的存在，并测定所述至少一种分子或标志物的水平；/no)将所述第一多个混合物中的所述至少一种分子或标志物的水平和所述第二多个混合物中的所述至少一种分子或标志物的水平进行比较；及/np)将在所述第二多个混合物中比在所述第一多个混合物中更高水平的所述至少一种分子或标志物与对所述疫苗的免疫应答相关联。/n