[发明专利]一种单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针及其在检测间日疟原虫乳酸脱氢酶中的应用

摘要

一种单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针及其在检测间日疟原虫乳酸脱氢酶中的应用，属于荧光探针技术领域。该荧光探针具有结构简单、易合成、稳定性强、生物兼容性好等优点，并能够对间疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)产生大幅度的线性荧光增强响应。该响应具有检测范围宽(0～1.0×10‑6mol/L)、灵敏度高，其检测限能够达到3.7ng/mL。另外，通过引入辅助剂“Al3+”，该探针能够彻底区分间疟原虫乳酸脱氢酶和其它类型的乳酸脱氢酶。本发明的检测方法速度快、操作简便、信号稳定、灵敏度高、无需预处理，无需复杂的检测仪器。

主权项

1.一种单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针，其由如下步骤制备得到：(1)利用蒸馏水配制20mmol/L的单磷酸腺苷溶液、10mmol/L的氯金酸溶液、10mmol/L的硝酸银溶液、500mmol/L的柠檬酸钠溶液；(2)向反应釜中分别依次加入2.5mL、20mmol/L的单磷酸腺苷溶液，5.9mL的蒸馏水，0.2mL、10mmol/L的氯金酸溶液，1mL、10mmol/L的硝酸银溶液，0.4mL、500mmol/L的柠檬酸钠溶液，将反应釜放入120℃的干燥箱中加热30分钟后停止加热，待反应釜冷却至室温，即得到单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针原液；或，称取50mmol单磷酸腺苷固体于反应容器中，加入8.4mL蒸馏水混合充分，向混合溶液中加入0.2mL、10mmol/L氯金酸溶液，1mL、10mmol/L硝酸银溶液，0.4mL、500mmol/L柠檬酸钠溶液，使用电加热套于80℃搅拌6h后，停止加热，待反应容器冷却至室温，即得到单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针原液；(3)将步骤(2)获得的单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针原液用丙酮沉淀的方法进行纯化，其中丙酮和单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针原液的体积比为2：1，然后离心去掉上清，冻干沉淀即得到单磷酸腺苷保护的金银合金纳米簇荧光探针固体样品，在4℃条件下避光保存。