[发明专利]利用沙拐枣花粉离体萌发液体培养基测定沙拐枣花粉活力的方法

摘要

本发明涉及一种利用沙拐枣花粉离体萌发液体培养基测定沙拐枣花粉活力的方法，该方法采用培养基的配制、花粉采集、花粉离体萌发及花粉管生长和花粉活力的测定步骤完成，本发明所述方法选取精河沙拐枣的花粉进行花粉离体培养，在确定沙拐枣花粉离体萌发培养体系的基础上，能够可靠、有效的测定花粉活力。以花粉萌发率作为花粉活力研究的指标（花粉管长度长于花粉直径视为萌发）。为沙拐枣属植物花粉活力测定提供一种简单、快速、可行的方法，为该属的杂交育种及繁殖生物学研究提供基础。

主权项

1.一种利用沙拐枣花粉离体萌发液体培养基测定沙拐枣花粉活力的方法，其特征在于按下列步骤进行：培养基的配制：a、以蒸馏水为溶剂，pH值为5.6，100g/L蔗糖、32mg/L硼酸、36.5mg/L Ca (NO3)₂，光照培养后20‑35min；花粉采集：b、选择生长发育良好、无病虫害的健壮沙拐枣植株，于盛花期上午时间8:00‑9:00采集整个花枝，带回，插于瓶中，待花朵自然开放，花粉散出，小心用镊子摘下花朵，收集备用；花粉离体萌发及花粉管生长：c、将步骤a配置好的培养基滴入凹型载玻片的凹槽中，用毛笔蘸取步骤b得到的花粉均匀的洒落在液体培养基上，置于底部垫有滤纸的培养皿中，盖好盖后置于恒温培养箱内，温度20‑30℃离体光照萌发培养，离体培养时间25‑35min；花粉活力的测定：d、将步骤c离体培养25‑35min后，待花粉管长度超过花粉粒直径为花粉萌发，开始统计花粉萌发率，用OLYMPUS BX51 型显微镜观察花粉萌发情况，每个处理重复3次，每个重复随机观察3个视野，每个视野花粉总数大于50粒，统计花粉萌发数占花粉总数的比例，计算花粉活力。