[发明专利]一种猪肌组织发育相关基因MYH7的表达检测方法有效
申请号: | 201910501244.0 | 申请日: | 2019-06-11 |
公开(公告)号: | CN110241228B | 公开(公告)日: | 2023-06-20 |
发明(设计)人: | 王海珍;高鹏飞;郭晓红;曹果清;李步高 | 申请(专利权)人: | 山西农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京栈桥知识产权代理事务所(普通合伙) 11670 | 代理人: | 刘亚娟 |
地址: | 030801 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | 本发明提供了一种猪肌组织发育相关基因MYH7的表达检测方法,包括引物设计与合成、RNA的提取、cDNA的合成、实时荧光定量PCR反应、PCR产物的鉴定,所述引物设计与合成以18S为内参基因,根据NCBI genebank中猪MYH 7、18S基因的mRNA序列进行同源性比对设计合成。本发明利用qPCR技术检测MYH7基因三个转录本在两个品种不同生长发育阶段和三种肌肉组织中的表达变化,对该基因在两个品种中的时序性表达变化趋势以及组织差异进行分析,结果表明本发明采用这种方法可以准确可靠的检测出不同品种猪的不同部位肌肉纤维的品质,可用于在养殖过程中根据不同品种猪的肌肉发育进行分子调控的理论指导,给瘦肉型猪品种选育提供了可行性参考。 | ||
搜索关键词: | 种猪 组织 发育 相关 基因 myh7 表达 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种猪肌组织发育相关基因MYH7的表达检测方法,包括引物设计与合成、RNA的提取、cDNA的合成、实时荧光定量PCR反应、PCR产物的鉴定,其特征在于:所述引物设计与合成以18S为内参基因,根据NCBIgenebank中猪MYH7、18S基因的mRNA序列进行同源性比对设计合成,其中,所述MYH7包括MYH7‑1、MYH7‑2、MYH7‑3,所述MYH7‑1基因引物序列为F:5'‑TGCCAAACTCACTCCTTCCT‑3'R:5'‑TGTAGGCCTTGACCTTCAGC‑3';所述MYH7‑2基因引物序列为F:5'‑ACCCTGGAGCTCTCCTCCTA‑3'R:5'‑TCTGCATCAGCCAGATTGTC‑3';所述MYH7‑3基因引物序列为F:5'‑AGACCTGTCCCAGCTTCAGA‑3'R:5'‑TGCTCCTTCTTCAGCTCCTC‑3';所述18S基因引物序列为F:5'‑CCCACGGAATCGAGAAAGAG‑3'R:5'‑TTGACGGAAGGGCACCA‑3'。
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