[发明专利]一种短乳杆菌的转化方法有效
| 申请号： | 201910328711.4 | 申请日： | 2019-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN109897863B | 公开（公告）日： | 2020-12-29 |
| 发明（设计）人： | 李晓敏;刘晓慧;蔡国林;吴殿辉;陆健 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12R1/24 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种短乳杆菌的转化方法，属于食品微生物技术领域。由于乳酸菌不同种属之间菌株的生化特性、分子构成和免疫特性均不相同，本发明在已有乳酸乳球菌以及不含内源性质粒短乳杆菌电转化方法的基础上进行了改进，将短乳杆菌分别用MRS培养基和含1％甘氨酸的MRS培养基连续活化两次，继续培养至菌体达到较高浓度时收集并制备感受态细胞，以增加感受态细胞浓度和活性。电转化外源DNA片段时电击条件为2.4KV、3.5ms，增加电转化效率。经检验，外源基因成功转化感受态细胞，解决了野生型短乳杆菌电转化感受态制备和转化的难题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 杆菌 转化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种短乳杆菌转化方法，其特征在于，所述方法包括：(1)活化短乳杆菌；(2)培养活化后的短乳杆菌至OD600为0.8‑1.0；(3)收集菌体，制备感受态细胞；(4)感受态细胞内加入外源DNA片段后经电击、电转化短乳杆菌感受态细胞，电压设置为2.4‑2.6KV，电击时间为2‑4ms；(5)感受态细胞复苏，涂布MRS平板，筛选转化子。
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