[发明专利]一种智能全基因组范围的植物基因功能鉴定系统及方法在审
| 申请号： | 201910311151.1 | 申请日： | 2019-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN109971785A | 公开（公告）日： | 2019-07-05 |
| 发明（设计）人： | 王超;宋文路;倪飞;薛丽萍;黄廷莉;玄亚男;季彤;闫晓宇 | 申请（专利权）人： | 济宁学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 273155 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种智能全基因组范围的植物基因功能鉴定系统及方法，包括以下方法步骤，S1,将含有目标基因的重组质粒转入到营养培养基中，诱导形成转基因毛状，待毛状生长成新生组织物；S2，然后将新生的组织物进行透析；S3，然后切取0.32mm膜，将膜置于100％葡萄糖中10s，充分浸透后膜变为半透明状，然后进行振摇3min；S4，利用标记探针对其进行标记；S5，再利用RNA探针插入至膜片内部，同时注入微量工程核酸酶进行检测；S6，通过产生DNA双链断裂激活植物内源修复途径,基因组编辑对靶位点的定点突变,缺失或者基因的插入与替换，实现检测基因功能。本发明的方法检测准确，而且具有费用低，检测周期短，值得推广。 | ||
| 搜索关键词： | 植物基因功能 检测 鉴定系统 全基因组 毛状 葡萄糖 营养培养基 半透明状 定点突变 基因功能 目标基因 新生组织 重组质粒 智能 核酸酶 基因组 再利用 转基因 组织物 对靶 膜片 内源 切取 透析 位点 振摇 浸透 替换 诱导 激活 转入 修复 基因 生长 | ||
【主权项】：
1.一种智能全基因组范围的植物基因功能鉴定系统及方法，其特征在于：包括以下方法步骤，S1,将含有目标基因的重组质粒转入到营养培养基中，诱导形成转基因毛状，待毛状生长成新生组织物，S2，然后将新生的组织物：在6mmol/L PBS中加入3.5％聚乙烯聚吡咯烷酮、2mmol/L乙二胺四乙酸二钠、10mmol/L乙二基二硫代氨基甲酸酯；然后进行离心加工，离心力设为800g，时间控制为15min，再取上清，过0.2um滤膜，其次进行透析；S3，然后切取0.32mm膜，将膜置于100％葡萄糖中10s，充分浸透后膜变为半透明状，然后进行振摇3min；S4，利用标记探针对其进行标记，然后再利用DNA探针插入检测的膜片内部，同时放入同位素、生物素或荧光染料；S5，再利用RNA探针插入至膜片内部，同时注入微量工程核酸酶进行检测；S6，通过产生DNA双链断裂激活植物内源修复途径,基因组编辑对靶位点的定点突变,缺失或者基因的插入与替换，实现检测基因功能。
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