[发明专利]一种香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及香豆素糖苷类化合物的制备方法及其应用，可有效解决制备具有肝保护活性的新型香豆素糖苷类化合物的制备，并实现在制备肝保护药物中的应用问题，具有肝保护活性的新型香豆素糖苷类化合物是从小驳骨药材中分离得到的小驳骨酚苷A(genglycoside A，I)、小驳骨酚苷B(genglycoside B，Ⅱ)、小驳骨酚苷D(genglycoside D，Ⅲ)，本发明制备方法简单、重现性良好，所得化合物纯度高，有利于对其进行进一步的药理和临床研究，制备的具有肝保护活性的新型香豆素糖苷类化合物小驳骨酚苷A、小驳骨酚苷B、小驳骨酚苷D，有效用于制备肝保护药物，开拓了保肝药物的新途径和小驳骨的药用价值及商业价值，经济和社会效益显著。

主权项

1.一种香豆素糖苷类化合物小驳骨酚苷A(genglycoside A，I)、小驳骨酚苷B(genglycoside B，Ⅱ)、小驳骨酚苷D(genglycoside D，Ⅲ)，分子结构式分别为：其制备方法是，以小驳骨15–20kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为75％–95％的乙醇在90–95℃下加热回流提取3次，每次提取时间为1小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.6–4.8L的蒸馏水中，依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.6–4.8L，时间为1.5小时；将正丁醇萃取部位经AB‑8大孔吸附树脂柱色谱分离，依次用体积比为0:100、30:70、95:5乙醇‑水混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用3.8–5.0 L洗脱液，流速为5–10mLmin^‑1，将水洗脱液弃去，分别收集体积比为30:70、95:5乙醇‑水的洗脱流份，减压浓缩分别得组分Fr.N1和组分Fr.N2；将组分Fr.N1经硅胶柱色谱分离，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰20、100︰30、100︰50二氯甲烷‑甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，采用GF254薄层板，以体积比5︰2的二氯甲烷‑甲醇作为展开剂，以三氯化铁‑铁氰化钾试剂作为显色剂，分别收集含有目标化合物小驳骨酚苷D(Ⅲ)和小驳骨酚苷A(I)的流份，即为亚组分Fr.N1‑1和亚组分Fr.N1‑3；将亚组分Fr.N1‑1经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化，甲醇洗脱，每2mL为一流份，收集含有小驳骨酚苷D(Ⅲ)的流份，用甲醇重结晶即为小驳骨酚苷D(Ⅲ)；将亚组分Fr.N1‑3经高效液相色谱纯化，体积浓度为40％甲醇洗脱，收集12min的洗脱峰，即为小驳骨酚苷A(I)；将组份Fr.N2经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化，甲醇洗脱，每10mL为一流份，收集含有化合物Ⅱ的流份，得到个亚组份Fr.N2‑1，再经硅胶柱色谱纯化，用体积比100︰3、100︰5、100︰7、100︰10、100︰30的二氯甲烷‑甲醇作洗脱液进行梯度洗脱，合并含有目标化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)的流份，减压浓缩后用甲醇重结晶即为化合物小驳骨酚苷B(Ⅱ)。