[发明专利]靶向编辑bcr-abl融合基因的gRNA序列及其应用在审
| 申请号： | 201910272330.9 | 申请日： | 2019-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN109957570A | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 黄峥兰;骆贞红;高淼;冯文莉 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/85;C12N15/90;A61K48/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 重庆萃智邦成专利代理事务所(普通合伙) 50231 | 代理人： | 黎志红 |
| 地址： | 400016 重庆市渝中*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明提供靶向编辑bcr‑abl融合基因的gRNA序列及其应用，通过定位bcr‑abl基因中三段特异的靶序列位点DNA片段，并针对此特异位点构建gRNA表达质粒，将此质粒和FokI‑dCas9表达质粒及donor核转染K562细胞，可以使bcr‑abl基因发生定点断裂，并以供体DNA为模板进行同源修复，使其插入8个碱基最终导致bcr‑abl基因的破坏。本发明的显著优势表现在针对bcr‑abl序列中特异的靶序列位点构建的RFNs可高效靶向bcr‑abl基因发生DNA双链断裂，以HDR方式进行修复使bcr‑abl发生移码等突变而被破坏，从而丧失促增殖、抑凋亡等恶性转化潜能。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 位点 表达质粒 靶序列 构建 修复 恶性转化 融合基因 优势表现 供体DNA 促增殖 凋亡 碱基 三段 质粒 转染 同源 突变 应用 断裂 潜能 | ||
【主权项】：
1.一种靶向编辑bcr‑abl融合基因的gRNA序列，包括gRNA‑15、gRNA‑16或/和gRNA‑17序列，所述gRNA‑15序列包括左半位点序列SEQ ID NO：1和右半位点序列SEQ ID NO：2；所述gRNA‑16序列包括左半位点序列SEQ ID NO：3和右半位点序列SEQ ID NO：4；所述gRNA‑17序列包括左半位点序列SEQ ID NO：5和右半位点序列SEQ ID NO：6。
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