[发明专利]一种收集囊胚腔液体的方法

摘要

本发明公开了一种收集囊胚腔液体的方法，包括如下步骤：显微操作针的准备，用拉针仪，断针仪和磨针仪制作内径为10μm的注射针以及针口为40μm的固定针，注射针要将针尖拔尖；囊胚腔液体的收集，在显微操作仪下，用固定针固定住内细胞团一侧，用注射针刺入囊胚腔中吸取囊胚腔中的液体至于1μLDPBS液滴中，收集完成后用较细的口吸针将囊胚腔中的液体转移到进口200μL的离心管中；囊胚腔液体中DNA含量的检测。这种收集方法采用自制的较细的注射针易刺破囊胚腔，对囊胚后续发育所产生的影响较小，且较为精准，可以收集单个囊胚腔中的液体，为胚胎植入前遗传学筛查提供新的方法。

主权项

1.一种收集囊胚腔液体的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)显微操作注射针制备：取钝化好两端的细玻管一支，安装于拉针仪进行拉针，拉完针后，打开断针仪，制得内径为10μm的平口针，再进行磨针，使得针口磨成斜口，将磨好的针管进行断针、拔尖、弯针，使针管弯曲20°备用；(2)显微操作固定针制备：将上述拉好的针管安装在断针仪上断针，断好后针再进行弯针，使针管弯曲20°，将针卸下，置于针盒中备用；(3)囊胚腔液体的收集：首先用显微操作固定针将囊胚吸住，用显微操作注射针拨动囊胚使内细胞团与显微操作固定针针口紧贴，此时吸紧囊胚并用注射针穿过透明带后扎进囊胚腔中，吸出囊胚腔中的液体并转移到右侧的1μL的DPBS中即可,尽量不要吸取到任何细胞物质，收集10枚囊胚腔中的液体，用较细的口吸针将混在1μL DPBS中的囊胚液吸出，放入到进口的200μL进口离心管中；(4)将收集到的囊胚腔的液体进行DNA含量检测。