[发明专利]一种DNA表观遗传修饰的表面增强拉曼光谱检测方法有效

专利信息
申请号: 201811407848.0 申请日: 2018-11-23
公开(公告)号: CN109342396B 公开(公告)日: 2021-04-27
发明(设计)人: 吴萍;罗晓俊;邢应芳;蔡称心 申请(专利权)人: 南京师范大学
主分类号: G01N21/65 分类号: G01N21/65
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 楼高潮
地址: 210023 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种DNA表观遗传修饰的表面增强拉曼光谱检测方法,包括如下步骤:(1)制备周期性结构的金纳米孔阵列;(2)将不同表观遗传修饰的待测DNA配置成DNA混合溶液;(3)对不同DNA表观遗传修饰进行拉曼检测。该检测方法将不同表观遗传修饰的DNA吸附在阵列表面,根据修饰基团的拉曼指纹特征,实现了不同DNA表观遗传修饰的检测,且所述检测方法无需对DNA进行化学处理或者标记,操作简单,具有灵敏度高、重现性好的优点,极大地丰富了DNA表观遗传修饰的检测方法。
搜索关键词: 一种 dna 表观 遗传 修饰 表面 增强 光谱 检测 方法
【主权项】:
1.一种DNA表观遗传修饰的表面增强拉曼光谱检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1)制备周期性结构的金纳米孔阵列:将PMMA旋涂在玻璃基板上,然后将基板暴露于电子束,产生纳米孔阵列,在甲基异丁基酮/异丙醇溶液中显影后接着用异丙醇冲洗,然后通过热蒸发镀膜技术将金膜蒸发到纳米孔阵列上,得到所述周期性结构的金纳米孔阵列,清洗后备用;步骤2)配置DNA混合溶液:将不同表观遗传修饰的待测DNA分别溶解在Tris‑HCl缓冲液中得到DNA溶液,取DNA溶液与TCEP溶液常温下混合反应,得到所述DNA混合溶液;步骤3)不同DNA表观遗传修饰的拉曼检测:将步骤2)制得的DNA混合溶液滴涂在步骤1)制备的金纳米孔阵列中,0.5h后取出并用氮气吹干,用拉曼仪器在金纳米孔阵列表面不同区域处采集拉曼信号进行检测,观察不同待测DNA表观遗传修饰方式拉曼光谱图的特征差异,根据拉曼信号强度和位移的变化实现不同待测DNA表观遗传修饰的检测。
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