[发明专利]一种核酸适体核酶序列在审
| 申请号： | 201811343931.6 | 申请日： | 2018-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN109439659A | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 张何;李雯;黄幸芳;傅昕;杨梅 | 申请（专利权）人： | 湖南工程学院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;G01N33/573;C12Q1/682 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 尹明明 |
| 地址： | 411104 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于核酸适体核酶序列和分子间裂分G‑四链体‑氯化血红素DNA酶自组装纳米线的高灵敏度检测探针、试剂盒及其制备方法和应用，尤其适用于三磷酸腺苷(ATP)的检测。本发明将核酸适体、Mg2+依赖的10‑23核酶、杂交链式反应以及G‑四链体‑血红素DNA酶酶促反应结合起来，实现了检测信号的逐步放大，大幅度提高了检测的灵敏度，检测灵敏度可达pmol/L级别，高出现有技术通常检测灵敏度水平nmol/L级别3个数量级。其中ATP核酸适体核酶探针工作性能优秀，检测灵敏度限为2pmol/L，特异性很好，常见的UTP、GTP、CTP等其它干扰物质对ATP检测基本不产生影响，能够满足医学临床诊断及机体代谢研究等对超高灵敏度的ATP检测方法需求，在产业中极具推广潜力和实际应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸适体 检测灵敏度 核酶序列 四链体 核酶 链式反应 制备方法和应用 超高灵敏度 氯化血红素 三磷酸腺苷 干扰物质 高灵敏度 个数量级 工作性能 机体代谢 检测探针 检测信号 酶促反应 医学临床 灵敏度 纳米线 试剂盒 血红素 自组装 检测 探针 放大 杂交 诊断 应用 研究 | ||
【主权项】：
1.一种核酸适体核酶探针，其包含A、A’、B、C、C’、D、E、E’、F、G、H、H’、K部分组成的茎环结构，其中A与A’、C与C’、E与E’、H与H’部分分别互补配对，依次形成茎环B、D、F、G部分，茎环B为核酶序列，茎环F为核酸适体序列，K为核酶的切割位点，茎环G和H’部分为杂交链式反应的引发链序列，如图1所示；在核酸适体底物存在的情况下，核酸适体结构域茎环F与底物结合并形成紧密的结构，并促进核酶催化核心中活性二级结构的形成从而激活核酸适体核酶。
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