[发明专利]怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法

摘要

本发明公开了一种怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法，以怀远玉石籽石榴的茎尖、茎段及叶片为外植体，灭菌条件为0.1％HgCl₂，10min，愈伤组织诱导的培养基为MS+6‑BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+35g蔗糖+5.5g琼脂，诱导芽的培养基为WPS+6‑BA 1.0mg/L+35g蔗糖+5.5g琼脂，生根诱导培养基为WPS+IBA 0.8mg/L+35g蔗糖+5.5g琼脂。本发明的培育方法有利于培养高质量的石榴种苗，提高石榴结果的数量和质量。

主权项

1.一种怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法，其特征在于，包括如下步骤：1)外植体选择及预处理：选择健壮的无病虫害玉石籽石榴的新生腋芽、嫩茎段及新生叶片，作为组织培养的外植体，用流水冲洗10min后采用10mg/L GA3浸泡30min后备用；2)外植体接种：腋芽接种：取上述GA3浸泡好的腋芽，用75％酒精浸泡30sec后移入超净工作台，在超净工作台上，先用无菌水冲洗3遍，再用解剖针剥去芽鳞，后用0.1％HgCl2消毒8min，无菌水冲洗5遍后切去腋芽下方木质部，接种于初代腋芽接种培养基上；茎段接种：取上述GA3浸泡好的茎段用75％酒精浸泡30sec后移入超净工作台，在超净工作台上，先用无菌水冲洗3遍，后用0.1％HgCl2消毒5min，无菌水冲洗5遍，切长1.0‑1.5cm、只含1个节点的茎段，接种在初代茎段培养基上；叶片接种：取上述GA3浸泡好的叶片用75％酒精浸泡30sec后移入超净工作台，在超净工作台上，先用无菌水冲洗3遍，后用0.1％HgCl2消毒3min，无菌水冲洗5遍，将叶片切成1.0*1.0cm2小块，并将叶片背面划伤，将背面贴向培养基，接种于初代叶片接种培养基上；3)增殖培养：上述腋芽接种25d、茎段接种20d、叶片接种40d后，将生长好外植体取切成1.5‑2cm茎段，每段含有1‑2个茎节，接种于增殖培养基中，在培养室培养35‑40d；4)生根培养：上述外植体增殖培养35‑40d后，将外植体切除底部愈伤，然后接种于生根培养基中，在培养室培养45d；5)炼苗：打开组培瓶盖，进行炼苗，炼苗时间为3‑5d；6)移栽：炼苗后，挑选健壮幼苗洗净根部培养基，移栽到基质育苗盘中，放置于温室中，光照为自然光照，温度为16‑30℃，空气相对湿度70％，每日早晚于叶片上喷水，保持叶面及土壤湿润，每隔两周喷施稀释10倍WPM工作液，移栽30d后，大田种植。