[发明专利]红豆杉提取物中总萜的检测方法

摘要

本发明公开了一种红豆杉提取物中总萜的检测方法，具体步骤如下：(1.1)样品处理：(1.2)、标准曲线的绘制：(1.3)、样品测定：根据样品中的总萜含量高低，取10mL待测液，按标准曲线制备操作步骤于565nm处测定吸光度；(1.4)、根据标准曲线，求出相当于试样吸光度的紫杉醇含量，按下列公式求出总萜含量。本发明的有益效果为：对功效成分总萜的确定及成份含量测定等质量标准相关项目的检测分析，最终形成完整的减毒红豆杉提取物企业标准。

主权项

1.一种红豆杉提取物中总萜的检测方法，其特征在于：具体步骤如下：(1.1)样品处理：称取0.05g红豆杉提取物，置于50mL烧杯中，加入15mL 60％乙醇溶液，超声10min，用60％乙醇溶液定容至50mL；称取1.5～2g经预处理的聚酰胺树脂粉末，湿法装柱，用水饱和；吸取上述乙醇水溶液5mL，沿层析柱慢慢滴入柱内，放置一段时间20min，待测液被充分吸附后，先用30％乙醇溶液冲洗，舍去洗脱液，再用60％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液20mL左右，用60％乙醇溶液定容至25mL，得到待测液；(1.2)、标准曲线的绘制：准确吸取紫杉醇标准溶液0mL、1.00mL、2.00mL、2.50mL、3.00mL、4.00mL，分别移入50mL小烧杯中，于80℃水浴蒸干或加氮气吹干，然后加入0.4mL 5％香草醛冰醋酸溶液，混匀，再加入1ml高氯酸，混匀，60℃水浴加热15min后移入冰浴中冷却，并加入5ml冰醋酸，混匀后置室温下，在15～30min内，在565nm处测定吸光度，绘制紫杉醇含量mg与吸光度的标准曲线；(1.3)、样品测定：根据样品中的总萜含量高低，取10mL待测液，按标准曲线制备操作步骤于565nm处测定吸光度；紫杉醇浓度在0.25～1.00mg范围内呈直线，以最小二乘法计算，其回归方程为Y＝0.7945X‑0.0324，R2＝0.9993；(1.4)、根据标准曲线，求出相当于试样吸光度的紫杉醇含量，按下列公式求出总萜含量：式中：X—样品中总萜含量(以紫杉醇计)[mg/g]；m1—依据标准曲线计算出被测液中总萜含量(mg)；m—试样的质量或者体积(g)；V1—待测液分取的体积(mL)；V2—待测液的总体积(mL)。