[发明专利]一种检测干血片中代谢物的方法及试剂盒有效
申请号: | 201811044060.8 | 申请日: | 2018-09-07 |
公开(公告)号: | CN109142577B | 公开(公告)日: | 2020-11-10 |
发明(设计)人: | 张春燕;田亚平 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 徐蓓;尹妍 |
地址: | 100853*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种检测干血片中代谢物的方法及试剂盒,所述代谢物分别为丙二酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、甲基枸橼酸和总同型半胱氨酸;向干血片中加入含有内标品的萃取剂,对干血片实施萃取,振荡孵育,之后衍生化,采用液相色谱‑串联质谱方法检测经上述处理的干血片样品中的丙二酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、甲基枸橼酸和总同型半胱氨酸。本发明可测定滤纸干血片样本中丙二酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、甲基枸橼酸和总同型半胱氨酸的浓度,用于辅助诊断甲基丙二酸血症、甲基丙二酸血症合并同型半胱氨酸血症、同型半胱氨酸血症和丙酸血症;诊断效率高,并可缩短诊断时间。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 片中 代谢物 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种检测干血片中代谢物的方法,其特征在于,所述代谢物分别为丙二酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、甲基枸橼酸和总同型半胱氨酸;检测方法步骤如下:(1)向内标品中加入萃取剂,混匀,制成内标品溶液;所述内标品为丙二酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、甲基枸橼酸、总同型半胱氨酸的同位素内标混合物;(2)将待测滤纸干血片置于内标品溶液中振荡孵育,获取孵育溶液;(3)在孵育溶液中加入衍生化试剂进行衍生化处理后,再次振荡孵育,之后流动氮气吹干;(4)加入含体积分数0.02 – 0.05%甲酸的超纯水复溶,振荡孵育;(5)取步骤(4)获取的孵育溶液,采用液相色谱‑串联质谱方法检测丙二酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、甲基枸橼酸和总同型半胱氨酸浓度。
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