[发明专利]一种用蜗牛酶制备壳寡糖的方法及其用途

摘要

本发明属于低聚糖制备技术领域，具体涉及一种用蜗牛酶制备壳寡糖的方法及其应用。本发明提供的用蜗牛酶制备壳寡糖的方法，对蜗牛酶酶解壳聚糖的酶解时间、酶解温度、底物浓度、酶底质量比等具体的工艺条件进行探索和优化，提高酶解效率，结合冷冻干燥法，保持了壳寡糖的性状，便于产品的保存和进一步使用，为蜗牛酶制备壳寡糖的大生产提供依据。本发明制得的壳寡糖还可以显著的改善特发性肺纤维化大鼠模型的纤维细胞活化，对特发性肺纤维化具有很好的改善作用，有利于特发性肺纤维化患者的康复。

主权项

1.一种用蜗牛酶制备壳寡糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1取壳聚糖原料干燥至恒重，溶解于乙酸‑乙酸钠缓冲液中，搅拌溶解，配制成质量浓度为1.0％的壳聚糖溶液；S2向步骤S1所得壳聚糖溶液中加入质量浓度为1.0％的蜗牛酶溶液，所述蜗牛酶和壳聚糖底物质量比为1:10，于水浴箱35～45℃中酶解2h～3h后，100℃水浴5～15min灭活，冷却至室温，连续搅拌，滴加质量浓度为5％的NaOH溶液，调节pH值至4～6，过滤，收集滤液；S3将步骤S2所得滤液装入内层装有截留分子量为3000Da再生纤维素透析袋，外层包有截留分子量为1000Da再生纤维素透析袋的透析装置，在蒸馏水中透析24h，每8h换一次透析液，连续收集透析液，浓缩，得浓缩液；S4将步骤S3中所得浓缩液平铺在托盘中，厚度为4±1mm，放入冰箱中预冷冻，待到冷凝器温度降至‑50℃～‑60℃时，真空干燥升华，待温度回升至28℃时，取出，收集干粉即得。