[发明专利]一种乙型肝炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法在审
| 申请号： | 201811038647.8 | 申请日： | 2018-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN109251997A | 公开（公告）日： | 2019-01-22 |
| 发明（设计）人： | 周勇;项周 | 申请（专利权）人： | 重庆高圣生物医药有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 400039 重庆市九龙坡区二*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的快速方法。根据GenBank公布的乙肝病毒DNA的C基因区域的保守序列设计引物，建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒和进行阴阳性判断的方法。本发明的方法具有灵敏度高，重复性好，特异性强，成本低廉，耗时短，检测准确等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 荧光定量PCR检测 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒DNA 乙肝病毒DNA 保守序列 设计引物 特异性强 灵敏度 阴阳性 耗时 检测 | ||
【主权项】：
1.一种乙型肝炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：一、根据乙肝病毒DNA的C基因区域的保守序列设计引物依据HBV C基因序列，通过DNAMAN软件进行序列比对，确定C基因特异序列区，在该区域设计特异性针对C的荧光定量引物序列如下：上游引物HBVC‑F，序列为：SEQ ID NO.1下游引物HBVC‑R，序列为：SEQ ID NO.2二、标准曲线的构建依据步骤一设计的引物，以 XRV 全长 Sl 基因 cDNA 为模板，进行荧光定量扩增，绘制荧光定量标准曲线三、实验结果判定标准若阴性对照品无 Ct 值，且无规则扩增曲线，同时阳性对照品 Ct 值应小于35.0 ，扩增曲线典型，待测样品的 Ct 值小于35.0 ，并且出现典型的扩增曲线，判断为阳性，待测样品无 Ct 值或者大于35并且无规则扩增曲线，判断为阴性。
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