[发明专利]一种用于治疗I型糖尿病的细胞组合制剂的制备方法及应用

摘要

一种用于治疗I型糖尿病的细胞组合制剂的制备方法及应用，属于再生医学与糖尿病学领域，包括以下步骤：A、获取人羊膜上皮细胞(hAECs)组织；B、恒温体外培养；C、诱导分化及收集细胞；D、传代培养；E、调配透明质酸溶液；F、将hAECs细胞加入到透明质酸溶液中并调整；G、静脉注射移植。通过动物实验可以明确得出，联合用药的模型组，可以极大程度的改善小鼠体内的血糖水平、胰岛素水平，移植8周后，小鼠体内的血糖水平、胰岛素水平、腹腔糖耐量的数值极为接近正常组数值；血浆中炎性因子水平均明显下调，综上，基于hAECs和透明质酸的良好生物学特性，本发明首次建立了hAECs联合透明质酸移植治疗I型糖尿病的方法，并取得显著疗效。

主权项

1.一种用于治疗I型糖尿病的细胞组合制剂的制备方法，其特征在于 ，包括以下步骤：A、获取人羊膜上皮细胞hAECs组织；B、以低糖DMEM完全培养基为应用基质，恒温体外培养人羊膜上皮细胞，每隔2天换液一次；C、当细胞生长融合度达到规定数值，用胰蛋白酶溶液消化，终止消化后，离心后用D‑PBS洗涤，再离心，收集细胞；D、将步骤C中收集的细胞接种含低糖DMEM完全培养基的培养瓶中，当细胞生长融合度达规定值时，进行传代培养，收集适当代数hAECs细胞；E、利用无血清低糖DMEM培养基调配透明质酸溶液；F、取步骤D中的hAECs细胞加入到步骤E配制的透明质酸溶液中，调整hAECs细胞在溶液中的个数达到规定数值，混匀；G、通过静脉注射的方式将步骤F中得到的细胞组合制剂输入到I型糖尿病患者的体内。