[发明专利]基于静电吸附的胞外囊泡及其内含物的提取方法及装置在审
申请号: | 201810649131.0 | 申请日: | 2018-06-22 |
公开(公告)号: | CN108841777A | 公开(公告)日: | 2018-11-20 |
发明(设计)人: | 孔关义;赵立波;陈苏红;杨玉清;李志 | 申请(专利权)人: | 北京恩泽康泰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12M1/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
地址: | 102206 北京市昌平区中关村生命科*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种基于静电吸附的胞外囊泡及其内含物的提取方法及装置,生物样品经预处理后,加至内部装有阴离子交换树脂颗粒的提取装置中,流出液经所述提取装置底部的端口排出,用清洗缓冲液清洗所述提取装置,然后可用洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱的胞外囊泡,或直接将捕获在树脂中的胞外囊泡裂解并提取内含物。其中,所述阴离子交换树脂颗粒表面修饰有以下官能团中的至少一种:季铵、叔胺、仲胺、伯胺。通过将生物样品与阴离子交换树脂颗粒充分接触,在静电作用下使表面带负电荷的胞外囊泡吸附在颗粒表面,从而实现快速高效地分离。本发明利用静电吸附对胞外囊泡进行分离,能够在30分钟内从多种生物样本中回收超过50%的胞外囊泡。 | ||
搜索关键词: | 外囊 阴离子交换树脂 静电吸附 提取装置 内含物 生物样品 洗脱 表面带负电荷 颗粒表面修饰 预处理 清洗缓冲液 洗脱缓冲液 充分接触 静电作用 颗粒表面 生物样本 流出液 树脂 伯胺 季铵 可用 裂解 排出 叔胺 吸附 仲胺 捕获 清洗 回收 | ||
【主权项】:
1.基于静电吸附的胞外囊泡及其内含物的提取方法,其特征在于,生物样品经预处理后,加至内部装有阴离子交换树脂颗粒的提取装置中,流出液经所述提取装置底部的端口排出,用清洗缓冲液清洗所述提取装置,弃流出液,然后进行如下I或II操作:操作I:直接向所述提取装置中加入裂解液,收集的流出液中含有胞外囊泡和/或其内含物;操作II:清洗后的所述提取装置用洗脱缓冲液进行洗脱,收集的洗脱液中含有胞外囊泡;其中,所述阴离子交换树脂颗粒表面修饰有以下官能团中的至少一种:季铵、叔胺、仲胺、伯胺。
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