[发明专利]一种杂交鹅掌楸亲缘关系的鉴定方法有效
| 申请号： | 201810543423.6 | 申请日： | 2018-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN108660196B | 公开（公告）日： | 2019-09-10 |
| 发明（设计）人： | 陈金慧;龙晓飞;施季森;成铁龙;肖保荣;刘思芹;翁禹豪;胡凌峰;刘阳 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种杂交鹅掌楸亲缘关系的鉴定方法及其专用试剂盒，该方法包括：1)提取杂交鹅掌楸叶片DNA；2)进行PCR检测；3)用引物18.2能特异性扩增出400bp的产物的母本为中国鹅掌楸，能特异性扩增出382bp的产物母本为北美鹅掌楸，再用引物700对中国鹅掌楸的进行PCR扩增，能特异性扩增出700bp产物的母本为中国鹅掌楸西部种源，能特异扩增出242bp产物的母本则为中国鹅掌楸东部种源；对北美鹅掌楸的用引物700进行PCR扩增，均特异获得700bp的产物。本发明可对幼苗阶段的杂交鹅掌楸天然林进行有效鉴定，具有速度快，效率高，结果准确，重复性与稳定性好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 母本 杂交鹅掌楸 特异性扩增 引物 亲缘关系 种源 专用试剂盒 特异扩增 幼苗阶段 叶片DNA | ||
【主权项】：
1.一种杂交鹅掌楸亲缘关系鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：1）提取后代树种的叶片DNA；2）进行PCR检测；3）用引物对18.2能特异性扩增出400bp的产物的母本为中国鹅掌楸，能特异性扩增出382bp的产物母本为北美鹅掌楸；4）再用引物对700对已鉴别为母本为中国鹅掌楸的进行PCR扩增，能特异性扩增出700bp产物的母本为中国鹅掌楸西部种源，能特异扩增出242bp产物的母本则为中国鹅掌楸东部种源；对已鉴别为母本为北美鹅掌楸的用引物对700进行PCR扩增，均特异获得700bp的产物；其中，引物对18.2左端引物序列为：AATTCTCTCAATTTCACTTTGCCT；引物对18.2右端引物序列为：TGGTCGATGCATTCTGTTTCT；引物对700左端序列为：TATGGTATATTCTATTCGGTT；引物对700右端序列为：TCATTCCAATTCTACCGAT；其中，西部种源为贵州陌南种源，东部种源为江西庐山种源。
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