[发明专利]一类超分子水凝胶纳米材料及凝胶因子前体及其制法

摘要

本发明公开了一类荷载抗炎小分子药物的超分子水凝胶纳米材料及酶敏感凝胶因子前体及其制备方法，特征是通过有机合成反应合成荷载抗炎小分子药物的凝胶因子前体，通过加入碱性磷酸酶进行恒温孵育的方式控制成胶，能够直观地显示牛小肠来源的碱性磷酸酶的活性。本发明的荷载抗炎小分子药物的超分子水凝胶纳米材料凝胶因子合成简单，成胶条件容易控制；由于凝胶因子前体荷载有小分子药物，小分子药物可从侧链缓慢释放，因此可以延长药物驻留时间和提高药效。本发明填补了荷载抗炎小分子药物的超分子水凝胶材料及酶敏感凝胶因子前体及其制备方法方面的空白。

主权项

1.一类荷载抗炎小分子药物的超分子水凝胶纳米材料的酶敏感凝胶因子前体的制备方法，其特征在于：先合成地塞米松丁二酸N‑羟基琥珀酰亚胺活性酯，按：将2.55毫摩尔地塞米松溶于25毫升吡啶，加入含7.65毫摩尔丁二酸酐和0.255毫摩尔二甲氨基吡啶的1毫升吡啶溶液，在氮气保护下室温磁力搅拌反应过夜，用真空泵将吡啶去除后向残留物中加入40毫升去离子水，室温磁力搅拌十分钟，离心所得的沉淀再次使用去离子水进行清洗即得地塞米松丁二酸，命名为P1；取0.2毫摩尔地塞米松丁二酸与0.2毫摩尔N‑羟基琥珀酰亚胺混合溶解于10毫升三氯甲烷中，加入0.2毫摩尔二环己基碳二亚胺，室温磁力搅拌过夜反应，通过冷冻干燥以及高效液相色谱纯化后，得地塞米松丁二酸N‑羟基琥珀酰亚胺活化酯，命名为P2；再合成一段寡肽序列，按：将1毫摩尔2‑氯三苯甲基氯树脂在2‑3毫升N，N‑二甲基甲酰胺里溶胀15分钟后，加入2毫摩尔N‑芴甲氧羰基‑O‑磷酸基‑L‑酪氨酸，再加入2毫摩尔N，N‑二异丙基乙胺，反应6‑8小时后，用200微升甲醇反应30分钟，切去酪氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第二个氨基酸N‑芴甲氧羰基‑L‑赖氨酸反应6‑8小时，切去苯丙氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第三个氨基酸N‑芴甲氧羰基‑L‑苯丙氨酸反应6‑8小时，切去苯丙氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第四个氨基酸N‑芴甲氧羰基‑L‑苯丙氨酸反应6‑8小时，切去苯丙氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔1‑萘乙酸反应6‑8小时，最后用体积浓度为1％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液从该树脂上切下合成的肽段，用乙醚使其沉淀析出，冷冻离心并倾倒除去上层乙醚，乙醚挥发干后所得白色固体粉末即为萘乙酸修饰的磷酸化寡肽序列——萘乙酸‑苯丙氨酸‑苯丙氨酸‑赖氨酸(叔丁基氧羰基)‑酪氨酸‑O‑磷酸基，经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外波长226纳米及268纳米处有特征吸收的主要组分，即为第二种纯化合物P3；最后合成荷载地塞米松小分子药物的凝胶因子前体，按：将1毫摩尔纯化合物P3用含19毫升三氟乙酸和1毫升二氯甲烷以及200微升三异丙基硅烷的混合溶液在室温反应3小时脱去其赖氨酸侧链的保护基叔丁基氧羰基；通过真空泵干燥后用高效液相色谱分离纯化，收集在紫外波长226纳米级268纳米处有特征吸收的主要组分，得到第三种纯的化合物P4；将0.37毫摩尔地塞米松丁二酸N‑羟基琥珀酰亚胺活化酯P2溶解于4毫升N，N‑二甲基甲酰胺中，再将0.37毫摩尔P4和0.61毫摩尔N，N‑二异丙基乙胺加入上述溶液中并在室温磁力搅拌反应过夜，反应液经过高效液相色谱分离提纯，收集在紫外波长226纳米及268纳米处有特征吸收的主要组分，即为第二种纯化合物P5；其中固相多肽合成所用的氨基酸都是以9‑芴甲氧羰基作为α‑氨基保护基，而赖氨酸侧链氨基由叔丁基氧羰基修饰，酪氨酸的侧链酚羟基由磷酸基修饰；其中活化氨基酸的试剂是与氨基酸等摩尔量的1‑羟基苯并三唑和苯并三氮唑‑N,N,N',N'‑四甲基脲六氟磷酸盐，切除9‑芴甲氧羰基的试剂是体积浓度为20％的哌啶的N，N‑二甲基甲酰胺溶液；在每接上一个氨基酸和切去9‑芴甲氧羰基保护基时，都采用凯撒测试试剂检测氨基存在与否：若阳性，显蓝色，即表明已脱除9‑芴甲氧羰基保护基；若阴性，显黄色，则表明氨基酸已接上。