[发明专利]一种防污酶在氧化石墨烯表面的固定化方法

摘要

本发明属于海洋生物污损防护材料制备技术领域，具体涉及一种防污酶在氧化石墨烯表面的固定化方法，工艺过程包括分散、氨基化、醛基化和固定化，采用单层或多层氧化石墨烯作为防污酶的固定化载体，一是利用氧化石墨烯的吸附作用和氨基烷氧基硅烷的氨基化直接物理固定防污酶，二是利用氧化石墨烯表面的含氧基团(羟基、环氧基等)和戊二醛的醛基化化学固定防污酶，具体工艺过程是：首先将氧化石墨烯与氨基烷氧基硅烷混合制备成分散液并搅拌回流，使得氧化石墨烯分散液的氨基化，然后通过戊二醛对氨基化的氧化石墨烯醛基化，最后将防污酶固定在氨基化的氧化石墨烯表面形成共价结合的固定化防污酶；其固定化方法原理科学可靠，操作简便。

主权项

1.一种防污酶在氧化石墨烯表面的固定化方法，其特征在于工艺过程包括分散、氨基化、醛基化和固定化共四个步骤：(1)分散：将氧化石墨烯分散于氨基烷氧基硅烷甲苯溶液中进行超声分散，形成悬浊液，得到氧化石墨烯分散液，氧化石墨烯在悬浊液中的浓度为0.2‑0.9mg/mL；(2)氨基化：将氧化石墨烯分散液置于10‑80℃的条件下搅拌回流0.5‑12h，使氧化石墨烯表面氨基化，完成氧化石墨烯分散液的氨基化；(3)醛基化：将步骤(2)的氧化石墨烯分散液离心后收集氧化石墨烯，将氧化石墨烯超声分散于磷酸盐缓冲液中形成分散体系，通入氮气，并加入戊二醛，在5‑40℃的条件下搅拌0.5‑12h，离心去除上清液，分散至磷酸盐缓冲液中，氧化石墨烯在磷酸盐缓冲液中的浓度为0.2‑0.9mg/mL，得到醛基化后的氧化石墨烯分散液；(4)固定化：向步骤(3)制备的醛基化氧化石墨烯分散液中加入防污酶水溶液，防污酶在醛基化氧化石墨烯分散液中的浓度为0.1‑2.0mg/mL，在1‑40℃的条件下搅拌0.5‑12h，得到固定在氧化石墨烯表面的防污酶，用磷酸盐缓冲液清洗固定在氧化石墨烯表面的防污酶3次，采用真空冷冻干燥机对清洗后的防污酶进行冷冻干燥，得到固定化防污酶，完成防污酶在氧化石墨烯表面的固定。