[发明专利]一种防污酶在氧化石墨烯表面的固定化方法

权利要求书

1.一种防污酶在氧化石墨烯表面的固定化方法，其特征在于工艺过程包括分散、氨基化、醛基化和固定化共四个步骤：

(1)分散：将氧化石墨烯分散于氨基烷氧基硅烷甲苯溶液中进行超声分散，形成悬浊液，得到氧化石墨烯分散液，氧化石墨烯在悬浊液中的浓度为0.2-0.9mg/mL；

(2)氨基化：将氧化石墨烯分散液置于10-80℃的条件下搅拌回流0.5-12h，使氧化石墨烯表面氨基化，完成氧化石墨烯分散液的氨基化；

(3)醛基化：将步骤(2)的氧化石墨烯分散液离心后收集氧化石墨烯，将氧化石墨烯超声分散于磷酸盐缓冲液中形成分散体系，通入氮气，并加入戊二醛，在5-40℃的条件下搅拌0.5-12h，离心去除上清液，分散至磷酸盐缓冲液中，氧化石墨烯在磷酸盐缓冲液中的浓度为0.2-0.9mg/mL，得到醛基化后的氧化石墨烯分散液；

(4)固定化：向步骤(3)制备的醛基化氧化石墨烯分散液中加入防污酶水溶液，防污酶在醛基化氧化石墨烯分散液中的浓度为0.1-2.0mg/mL，在1-40℃的条件下搅拌0.5-12h，得到固定在氧化石墨烯表面的防污酶，用磷酸盐缓冲液清洗固定在氧化石墨烯表面的防污酶3次，采用真空冷冻干燥机对清洗后的防污酶进行冷冻干燥，得到固定化防污酶，完成防污酶在氧化石墨烯表面的固定。

2.根据权利要求1所述的防污酶在氧化石墨烯表面的固定化方法，其特征在于所述氧化石墨烯包括单层氧化石墨烯和多层氧化石墨烯，氧化石墨烯的微粒直径分布在20nm-10μm之间；氨基烷氧基硅烷包括3-氨丙基(二乙氧基)甲基硅烷、二乙烯三胺基丙基三甲氧基硅烷、(3-氨丙基)三甲氧基硅烷、(3-氨丙基)三(三甲硅烷氧基)硅烷、(3-氨基丙基)三乙氧基硅烷和3-(2-氨基乙基氨基)丙基甲基二甲氧基硅烷，氨基烷氧基硅烷的一端含有伯氨(-NH₂)或仲氨(-NH)基团，氨基烷氧基硅烷的另一端含有具有反应活性的烷氧基团，烷氧基团为甲氧基或乙氧基；氨基烷氧基硅烷甲苯溶液的质量百分比浓度为0.001-3.0％；戊二醛占分散体系的质量百分数为0.01-3.0％；防污酶为水溶性酶，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、透明质酸酶、几丁质酶和溶菌酶。