[发明专利]泡沫分离法浓缩人尿中尿激酶的方法

摘要

本发明的技术方案属于生物分离领域，尤其涉及泡沫分离法浓缩人尿中尿激酶的方法。该工艺包括：第一步，合格尿液的检测；第二步，合格尿液的预处理；第三步，两级泡沫分离工艺。该工艺通过加入尿激酶活性稳定剂有效抑制了泡沫分离过程中气‑液界面诱导的尿激酶失活，大幅提高了尿激酶活性的富集比(尿激酶活性富集比为100.0～233.3)，又能增大回收率(高尿激酶总活性收率为75.0～90.0％)。

主权项

1.泡沫分离法浓缩人尿中尿激酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：合格尿液的预处理：向收集到的合格尿液中加入尿激酶活性稳定剂，加入质量为尿液质量的0.2～0.5％，然后调节尿液pH至8.7；两级泡沫分离工艺：第一级泡沫分离工艺：对预处理尿液进行泡沫分离，用泡沫分离塔间歇分离，温度为20.0～30.0℃，表观气速为1.7～3.4mm/s，液层高度为1.0～1.6m，泡沫层高度为0.6～1.2m，对流出塔顶的泡沫进行收集并消泡，待泡沫不能从塔顶流出时，即可停止鼓气；从塔顶流出的泡沫经过消泡后得到第一级消泡液，其尿激酶活性浓度为50.0～80.0IU/mL，该消泡液直接作为第二级泡沫分离的进料；第二级泡沫分离工艺：将第一级分离得到的消泡液进行泡沫分离，用泡沫分离塔间歇分离，温度为35.0～45.0℃，表观气速为0.8～2.6mm/s，液层高度为0.8～1.2m，泡沫层高度为0.8～1.4m，对流出塔顶的泡沫进行收集并消泡，待泡沫不能从塔顶流出时，即可停止鼓气；从塔顶流出的泡沫经过消泡方法后得到第二级消泡液，其尿激酶活性浓度为500.0～700.0IU/mL，该消泡液作为亲和层析法纯化尿激酶的原料；泡沫分离塔内所剩残液的尿激酶活性浓度为15.0～35.0IU/mL，该残液稀释至与合格尿液的尿激酶活性浓度相同，与预处理尿液混合均匀后，作为第一级泡沫分离的进料液。