[发明专利]一种条斑紫菜倍半萜类抑藻活性化合物的制备方法与用途

摘要

一种条斑紫菜倍半萜类抑藻活性化合物的制备方法，条斑紫菜干粉末加无水甲醇浸提，减压蒸干得浸膏；浸膏加甲醇醇沉得上清；上清液乙酸乙酯萃取得抑藻组份B、C和D，采用硅胶柱层析进行分离得抑藻组份B2、B4、C1、C2、D3和D4，硅胶柱层析再次分离得抑藻组份B21、B23、B41、B42、C11和C12，除组份B21继续进行硅胶柱层析分离外，其余组份采用硅胶薄层层析进行制备；再分离得5个薄层纯抑藻倍半萜类化合物。本发明采用活性追踪法，通过甲醇浸提、液液萃取、硅胶柱层析和薄层层析制备等方法，从条斑紫菜中纯化制备具有抑制赤潮微藻活性的倍半萜类化合物。其方法设计合理，可操作性强，制得的化合物的抑微活性好。

主权项

1.一种条斑紫菜倍半萜类抑藻活性化合物的制备方法，其特征在于，其步骤如下：（1）条斑紫菜干粉末加入无水甲醇，15‑20℃下浸提12h后，获得浸提液；反复浸提3次，合并浸提液；经过滤和减压蒸干，制备到条斑紫菜浸膏；浸膏加入90%甲醇水溶液，充分振荡，4℃下静置过夜，离心、过滤，去除沉淀，保留上清液；上清液进行抑藻活性检测具有抑制米氏凯伦藻的生长的活性；（2）将上清液pH调至11，加入乙酸乙酯萃取3次；上层减压蒸干，获得组份A；下层减压蒸发出乙酸乙酯后，调节其pH为7，加入乙酸乙酯萃取3次，上层减压蒸干，获得组份B；下层pH调节到2，乙酸乙酯萃取3次，上层和下层分别减压蒸干，获得组份C和组份D；组份B、C和D进行抑藻活性检测具有抑制米氏凯伦藻的生长的活性；（3）组份B、C和D采用硅胶柱层析进行分离，组份B获得4个再分组份，B1、B2、B3和B4；组份C获得2个再分组份，C1和C2；组份D获得9个再分组份，D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8和D9；分别进行抑藻活性检测，其中6个再分组份B2、B4、C1、C2、D3和D4具有明显的抑制米氏凯伦藻活性，此6个活性组份采用硅胶柱层析进行再次分离，依次得到组份B21、B22、B23、B41、B42，B43，C11、C12和C21；D31和D41共11个组份，其中组份B21、B23、B41、B42、C11和C12具有显著抑制米氏凯伦藻的生长的活性，除组份B21继续进行硅胶柱层析分离外，其余组份采用硅胶薄层层析进行制备；B21经硅胶柱层析分离，得到B211和B212；B23、B41、B42、C11和C12经薄层层析制备，得到B231、B411、B421、C112和C121；其中B211、B212、B231、C112和C121共5个组份具有抑制米氏凯伦藻的生长的活性，且其纯度已达薄层纯；经结构鉴定，B211、B212、B231、C112和C121分别为Gossonorol、7,10‑epoxy‑ar‑bisabol‑11‑ol、cyclonerodiol、杜松醇和4‑杜松烯‑1‑醇，均为倍半萜类化合物。