[发明专利]筛选与G蛋白βγ二聚体相互作用蛋白质的酵母转化子及其筛选方法在审
申请号: | 201810355455.3 | 申请日: | 2018-04-19 |
公开(公告)号: | CN108559715A | 公开(公告)日: | 2018-09-21 |
发明(设计)人: | 赵爱春;刘长英;龙定沛;胡杰;向仲怀 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;G01N33/68 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | 本发明涉及一种筛选与G蛋白βγ二聚体相互作用蛋白质的酵母转化子及其筛选方法,该酵母转化子含有桑树β亚基和γ亚基的编码基因;将桑树cDNA文库转化至获得能同时表达β和γ亚基的酵母转化子中,最后利用His和Met两种营养缺陷筛选而得到与βγ二聚体相互作用的阳性克隆,最后成功筛选到与桑树G蛋白βγ二聚体互作的蛋白。该方法可高效筛选蛋白二聚体互作蛋白,并成功地应用于桑树G蛋白βγ二聚体互作蛋白的筛选。 | ||
搜索关键词: | 二聚体 酵母转化子 筛选 桑树 蛋白 蛋白质 营养缺陷筛选 蛋白二聚体 编码基因 高效筛选 阳性克隆 成功 转化 应用 | ||
【主权项】:
1.筛选与G蛋白βγ二聚体相互作用蛋白质的酵母转化子,其特征在于,包括如下步骤:1)将桑树β亚基和γ亚基的编码基因分别插入到将pBridge载体的MCS I和MCS II,重组质粒pBridge‑βγ;2)将步骤1)获得的重组质粒pBridge‑βγ转化AH109酵母中,获得筛选与G蛋白βγ二聚体相互作用蛋白质的酵母转化子。
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