[发明专利]一株光合细菌沼泽红假单胞菌荧光GFP标记载体的构建及其电转化方法在审
| 申请号： | 201810292042.5 | 申请日： | 2018-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN108949792A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 苏品;翟忠英;陈丽洁;刘勇;张德咏;程菊娥;王忠勇;唐雯;孔小婷 | 申请（专利权）人： | 湖南省植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/66;C12N15/78;C12N1/21 |
| 代理公司： | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 11548 | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 410000 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种载体重组及其构建方法，一株光合细菌沼泽红假单胞菌荧光GFP标记载体的构建及其电转化方法，所述重组载体包括光合细菌沼泽红假单胞菌荧光GFP标记载体包括PBBR1MCS‑2穿梭载体和绿色荧光蛋白标记基因GFP全长片段，融合了光合细菌基因组表达启动子PpckA基因和终止子TpckA基因，以及被广泛应用的GFP基因，基因GFP全长片段序列，基因GFP全长片段位于PBBR1MCS‑2穿梭载体ECORⅠ和SACⅠ两限制性内切酶位点之间，其构建方法包括：抽提基因组DNA、设计引物、PCR扩增、酶切、连接等步骤。本发明还包括含有上述重组载体得到工程菌，由上述重组载体经电击转化至感受态细胞得到。该工程菌稳定性高，工艺简单且对环境友好，可应用于光合细菌在植物中定殖行为的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 光合细菌 构建 沼泽红假单胞菌 标记载体 全长片段 重组载体 基因 荧光 穿梭载体 电转化 绿色荧光蛋白标记 限制性内切酶位点 工程菌稳定性 感受态细胞 基因组表达 基因组DNA 电击转化 环境友好 设计引物 载体重组 工程菌 启动子 终止子 抽提 酶切 应用 融合 研究 | ||
【主权项】：
1.一种重组载体，其特征在于：所述重组载体包括光合细菌沼泽红假单胞菌荧光GFP标记载体包括PBBR1MCS‑2穿梭载体和绿色荧光蛋白标记基因GFP全长片段(PpckA+GFP+TpckA)，所述绿色荧光蛋白标记基因GFP全长片段包含光合细菌启动子和终止子，所述绿色荧光蛋白基因GFP全长位于所述PBBR1MCS‑2穿梭载体的ECORⅠ和SACⅠ两限制性内切酶位点之间。
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