[发明专利]一种精细筛选出奶粉过敏蛋白中最优特征肽段的方法有效
| 申请号： | 201810219686.1 | 申请日： | 2018-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN108445130B | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 郝星凯;吴浩;王川丕;周明;孙美娜;王珍 | 申请（专利权）人： | 绿城农科检测技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88;G01N30/06;G01N30/02 |
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| 地址： | 310051 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种精细筛选出奶粉过敏蛋白中最优特征肽段的方法，具体涉及食品检测领域，该方法包括如下步骤：在样本溶液中依次加入三乙基碳酸氢铵缓冲液和二硫苏糖醇，并加入碘代乙酰胺，反应后得到待酶解样本溶液，且通过酶解得到酶解溶液。酶解溶液采用二甲基标记得到轻标溶液和重标溶液。将轻标溶液与重标溶液按质量比为1:1混合，采用纳流液相色谱串联Q‑Exactive高分辨质谱鉴别得到候选肽段。采用超高性能液相色谱串联三重四级杆对可识别的质谱信息所对应的候选肽段进行相对定量分析，筛选出峰面积比的相对标准偏差<10％的候选肽段，即得到特征肽段。本发明具有可筛选出性能最优的特征肽段的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 肽段 候选肽 筛选 过敏蛋白 酶解溶液 样本溶液 酶解 奶粉 串联 精细 碳酸氢铵缓冲液 相对标准偏差 二硫苏糖醇 高分辨质谱 定量分析 超高性能 峰面积比 食品检测 液相色谱 二甲基 可识别 四级杆 乙酰胺 质量比 碘代 流液 色谱 乙基 质谱 鉴别 | ||
【主权项】：
1.一种精细筛选出奶粉过敏蛋白中最优特征肽段的方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS01、将样本奶粉溶解在尿素溶液中，得到样本溶液；/n其中，样本溶液中包括多个一号子样本溶液，多个一号子样本溶液分别单独对应溶解在不同浓度的尿素溶液中，且尿素溶液的浓度处于0～8mol/L之间；/nS02、根据不同种类的样本奶粉所对应的过敏源信息筛选过敏蛋白；/nS03、(1)在每个所述的一号子样本溶液中依次加入三乙基碳酸氢铵缓冲液和二硫苏糖醇溶液，反应完成后，加入碘代乙酰胺，并放置于暗处或遮光反应，得到相应的待酶解样本溶液；/n其中，二硫苏糖醇溶液的浓度为100～500mmol/L；/n(2)于每个得到的待酶解样本溶液中加入蛋白酶，酶解反应完成后，即得到相应的酶解溶液；/nS04、在得到的酶解溶液中，分别依次加入体积分数为4％的CH
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