[发明专利]3D大脑类器官的制备方法有效
| 申请号： | 201810208751.0 | 申请日： | 2018-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN108456659B | 公开（公告）日： | 2020-05-05 |
| 发明（设计）人： | 范靖;王安欣;邹潭 | 申请（专利权）人： | 浙江霍德生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市经*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种3D大脑类器官的制备方法，包括：将RONA法获得的神经球经accutase消化为单细胞，计数后接种于细胞培养板上在培养基A中培养，培养至第7天后在培养基B中继续培养，培养至第25～35天时，Matrigel包裹神经球后继续培养至55～65天，第二次Matrigel包裹神经球后继续培养。本发明还提供了一种用于培养3D大脑类器官的培养基。本发明从RONA方法得到的高度纯化的神经球开始，用较为简单的方法可以控制并培养得到大小及结构均一的真正的3D大脑类器官，其具有大脑的六层皮层结构和抑制性中间神经细胞各亚型，适用于体外疾病研究、药物筛选等，具有重大的产业化的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 大脑 器官 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种3D大脑类器官的制备方法，其特征在于，包括：将RONA法获得的神经球经accutase消化为单细胞，计数后接种于细胞培养板上在培养基A中培养，培养至第7天后在培养基B中继续培养，培养至第25～35天时，包裹神经球后继续培养至55～65天，第二次包裹神经球后继续培养；所述第一培养基包括：维甲酸、BDNF、GDNF、抗坏血酸、cAMP、Neurobasal培养基和不含维生素A的B27添加剂；所述第二培养基包括：BDNF、GDNF、抗坏血酸、cAMP、Neurobasal培养基和不含维生素A的B27添加剂。
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