[发明专利]一种高纯度DNA或RNA的快速提取试剂盒及其提取方法在审
| 申请号： | 201810169271.8 | 申请日： | 2018-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN108342383A | 公开（公告）日： | 2018-07-31 |
| 发明（设计）人： | 唐荣;庞雨辰;吴丹;朱天慈;唐勋 | 申请（专利权）人： | 默禾医疗科技(上海)有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京君泊知识产权代理有限公司 11496 | 代理人： | 王程远 |
| 地址： | 200000 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高纯度DNA或RNA的快速提取方法，将生物样品加入裂解液中，搅拌混合均匀；接下来加入磁珠悬浮液，直接将裂解释放的DNA与磁珠搅拌均匀，制得磁珠‑DNA悬浮液，用洗液I和洗液II进行先后洗涤，去除裂解液中的盐和细胞破裂释放的蛋白质，制得的新磁珠‑DNA悬浮液，使用洗脱液将结合在磁珠表面的DNA洗脱下来，制得DNA样本。本发明的有益效果是为实验者提供了一种适合多种样品，不需要预处理的手动及全自动化核酸快速提取试剂盒，适合提取产量高，纯度高的DNA和RNA，操作简单，实现自动化后效率大大提升。样本包含唾液、体液、血液、组织、菌落等，所获核酸可以用于PCR扩增、基因测序、克隆、文库构建、分子标记、荧光定量等后续试验。 | ||
| 搜索关键词： | 快速提取 高纯度DNA 裂解液 试剂盒 悬浮液 核酸 磁珠 洗液 预处理 磁珠悬浮液 磁珠表面 分子标记 基因测序 全自动化 生物样品 文库构建 荧光定量 洗脱液 体液 唾液 菌落 得磁 去除 洗涤 蛋白质 样本 破裂 自动化 克隆 细胞 血液 释放 试验 | ||
【主权项】：
1.一种高纯度DNA或RNA的快速提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1样本裂解：将生物样品加入裂解液中，使用涡旋混匀器混合均匀，混合速度为2000～2500转/分钟，用时30‑60秒；接下来加入磁珠悬浮液，直接将裂解释放的DNA与磁珠搅拌均匀，搅拌速度为2000～2500转/分钟，制得磁珠‑DNA悬浮液，该步骤用时10‑15分钟；S2洗涤：将步骤S1制得的磁珠‑DNA悬浮液用洗液I和洗液II进行先后洗涤，去除裂解液中的盐和细胞破裂释放的蛋白质，洗涤时都使用涡旋混匀器，速度为2000～2500转/分钟，每次洗涤混匀时间都为60秒，洗液I洗涤用时2‑3分钟，洗液II用时4‑5分钟，洗涤步骤共用时6‑8分钟，制得新磁珠‑DNA悬浮液；S3洗脱：将步骤S2制得的新磁珠‑DNA悬浮液使用洗脱液将结合在磁珠表面的DNA洗脱下来，洗脱时使用涡旋混匀器振荡，速度为2000～2500转/分钟，振荡时间为5‑10分钟，制得高纯度DNA样本，该步骤用时8‑12分钟。
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