[发明专利]从核酸测序制备物除去衔接子二聚体的方法在审
申请号: | 201780060758.6 | 申请日: | 2017-07-31 |
公开(公告)号: | CN109790577A | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | R.W.戴维斯;A.比比罗 | 申请(专利权)人: | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 石克虎;黄希贵 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 提供了制备用于测序的多核苷酸的测序衔接子和方法。所述测序衔接子包含甲基依赖性内切核酸酶的识别序列的一部分。在衔接子与靶多核苷酸连接期间形成的不需要的衔接子二聚体产生完整的限制序列并被内切核酸酶切割,然后进行外切核酸酶消化,从而除去所述二聚体。 | ||
搜索关键词: | 衔接子 二聚体 测序 内切核酸酶 靶多核苷酸 外切核酸酶 多核苷酸 核酸测序 连接期间 制备物 制备 切割 消化 | ||
【主权项】:
1.一种制备用于测序的靶DNA双链体的方法,所述方法包括:(a) 提供多个测序衔接子,其中每个所述衔接子包含双链多核苷酸双链体区,其中所述双链多核苷酸双链体区在其末端包含甲基依赖性内切核酸酶的识别序列的一部分,其中如果两个衔接子的双链体区共价连接在一起产生衔接子二聚体,则将形成所述甲基依赖性内切核酸酶的完整识别序列;(b) 将所述测序衔接子的双链体区共价连接到多个平端靶DNA双链体的第一和第二末端,从而产生多个衔接子连接的靶DNA双链体,其具有共价连接在所述靶DNA双链体的每个末端的测序衔接子;和(c) 如果有任何衔接子二聚体,通过用甲基依赖性内切核酸酶消化,然后用一种或多种外切核酸酶消化,来除去所述衔接子二聚体。
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