[发明专利]一种石见穿的快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种石见穿的快速繁殖方法，经外植体的选取与灭菌、芽体的萌发、丛生芽诱导和增殖培养、生根培养、试管苗的移栽等步骤。本发明利用石见穿带芽根茎段为外植体，使得外植体取材较容易，一年四季均可取材，而且数量多，采用根茎芽体做外植体，保证了遗传稳定性，同时克服了组织培养中，愈伤组织在分化培养基上随着芽的分化而逐渐停止生长，失去增殖能力的弱点，可防止伤组织继代培养过程中，随着培养代数的增加，分化出来的苗出现变异的现象。

主权项

1.一种石见穿的快速繁殖方法，其具体操作步骤如下：1)外植体的选取与灭菌：选用石见穿的嫩茎上芽体作为培养材料，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗10-30分钟后，置于75％酒精中处理10-30秒，然后再经0.1％的升汞消毒后用无菌水冲洗，切去外植体变色的部分后备用；2)芽体的萌发：将灭菌处理后的芽体接种在N6+2，4-D0.5mg/L+6-BA1.4mg/L+IBA0.4mg/L培养基上，pH值为5.8，培养温度23-27℃，每天光照12小时，光照强度1000LX，接种后10-15天芽体的萌发，10天左右形成带叶的小苗；3)丛生芽诱导和增殖培养：将小苗切下转接于N6+2，4-D0.1mg/L+6-BA1.8mg/L+IBA0.4mg/L培养基上，直至形成丛生芽，pH值为5.8，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1000LX，25天左右为一个生长周期，以保持高速度递增，增殖系数为5以上；4)生根培养：选择N6+6-BA0.5mg/L+NAA1.5mg/L作为生根培养基，pH值为5.8，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1000LX，生根率达到90％以上，只需要20天左右形成完整植株；5)试管苗的移栽：选取根系生长良好的试管苗，放入清水中把根部的琼脂清洗干净，移载到沙土或富养土中，注意保水保温保湿，移载1个月后，移载成活率达到90％以上。