[发明专利]基于标签小分子专属分离-放大的LC-MS检测体内蛋白药物的定量方法及应用

摘要

本发明涉及一种应用于生物样品中痕量蛋白药物的高特异、高灵敏检测的分析方法，以凝血酶为研究示例，构建的功能化磁性纳米粒子特异性捕获样品中凝血酶，继而与表面同时修饰大量标签小分子和特异性结合蛋白的适配体的双功能化纳米金探针构成三明治夹心式复合物，基于此三明治结构，实现了检测靶标的转化，即以标签小分子代替蛋白药物作为进一步的质谱检测，规避了质谱直接检测蛋白大分子的响应低等困难，同时通过三明治夹心结构的构建，引入大量的与待测靶蛋白成比例的标签小分子，进一步实现了检测信号的放大，此外结合三明治夹心结构的高特异性及LC‑MS/MS的高灵敏度，建立了灵敏高效的无需蛋白酶水解的直接以LC‑MS/MS测定蛋白药物浓度的新方法。本发明的制备方法简单，操作简便，经济有效，快速灵敏，为LC‑MS/MS检测体内蛋白药物开启了新篇章。

主权项

本发明涉及一种应用于生物样品中痕量蛋白药物的高特异、高灵敏检测的分析方法，以凝血酶为示例药物，构建功能化磁性纳米粒子‑凝血酶‑双功能化纳米金探针的三明治夹心复合物，基于此实现了检测对象的转化及蛋白药物的浓度多倍放大，进一步结合建立的高灵敏、高选择的LC‑MS/MS，实现了无需酶解的高灵敏、快速简便的蛋白药物检测。