[发明专利]一种既能减少内部病毒粒子又能包埋外源蛋白的多角体的生产方法有效

专利信息
申请号: 201711451607.1 申请日: 2017-12-27
公开(公告)号: CN108192923B 公开(公告)日: 2020-09-29
发明(设计)人: 于少芳;卢红伶;胡文君;陈琳;裘晓云;沈国新 申请(专利权)人: 浙江省农业科学院
主分类号: C12N15/866 分类号: C12N15/866;C12N7/01
代理公司: 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 代理人: 尉伟敏
地址: 310021 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种既能减少内部病毒粒子又能包埋外源蛋白的多角体的生产方法,包括以下步骤:(1)构建含有多角体基因的pFast‑PH质粒;(2)构建含有egfp与ac12基因的重组pFast‑PH‑pPH‑ac12‑egfp质粒;(3)构建ac12基因过量表达bacmid‑bAcac12OE;(4)转染细胞,获得重组病毒:(5)将上述重组病毒感染细胞,纯化多角体。本发明在多角体基因之后插入重组外源基因片段,既不影响多角体的形成,又能使外源蛋白包埋入多角体;通过杆状病毒高效强力启动子多角体启动子与AC12蛋白融合表达的方法,实现重组蛋白的高水平表达,降低了多角体内部包涵病毒粒子的水平;为进一步开发利用杆状病毒‑昆虫表达系统,为多角体开发成为新型医疗载体和纳米材料创造了条件。
搜索关键词: 一种 减少 内部 病毒 粒子 包埋 蛋白 多角体 生产 方法
【主权项】:
1.一种既能减少内部病毒粒子又能包埋外源蛋白的多角体的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)构建含有多角体基因的pFast‑PH质粒;(2)构建含有egfp与ac12基因的重组pFast‑PH‑pPH‑ac12‑egfp质粒;(3)构建ac12基因过量表达bacmid‑bAcac12OE;(4)转染细胞,获得重组病毒;(5)将上述重组病毒感染细胞,纯化多角体。
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