[发明专利]一种模拟生态环境覆土培育蚕虫草的方法

摘要

一种模拟生态环境覆土培育蚕虫草的方法，包括以下步骤：(1)菌种宿主选择；(2)扩大培养菌种液体制备液；(3)接种前后处理；(4)填埋基质准备；(5)覆土培育管理：将步骤（2）优选菌种接于添加了5~8wt%蚕蛹粉的液体培养基中扩大培养后接种于步骤（1）健康蚕幼虫中感染僵化，然后将步骤（3）感染僵化尚未发菌的蚕体填埋于装有草木灰填埋基质的透明塑料盒中培养管理；子实体生长成熟后，将蚕体从草木灰填埋基质中取出，清理干净周围粘覆的草木灰，即获得成熟蚕虫草。本发明杂菌污染率低，感染僵化率、出草率高，所得蚕虫草稳定性好，产量较高，成本低，蚕虫草外观饱满整齐，适合规模化生产，开发前景广阔。

主权项

一种模拟生态环境覆土培育蚕虫草的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1) 菌种宿主选择：选择五龄4~6d家蚕原种或一代杂交种健康蚕体，5龄饷食后，在温度23‑27℃，相对湿度70‑80%环境条件下，连续给叶饲养，及时除沙，选择健壮的家蚕幼虫备用；(2) 扩大培养菌种液体制备液：选择于蚕蛹上生长优良的蛹虫草菌母种平板培养基上活化后，菌种均匀分割，接种于添加5~8wt%蚕蛹粉的液体培养基中，在黑暗条件、温度18‑22℃下静置培养2d，第3天开始振荡培养，每天振荡3~5h、130~140r/min，第5天在180‑220lx光照强度下培养1d，用3‑4层无菌纱布过滤除去菌丝，获得菌种液体制备液；所述蛹虫草菌母种为北冬虫夏草，活化后经过新鲜蚕蛹复壮优选后分离，纯化、保存后备用； (3) 接种前后处理：选择健壮洁净的家蚕幼虫，每头注射0.35‑0.45ml的步骤（2）所得菌种液体制备液，注射完成后将蚕体放在高温紫外处理的吸水纸上，吹风，然后将干爽洁净的家蚕从吸水纸上收起，放入纱网木框中，用纱网盖住，温度21~24℃，相对湿度60~70%通风条件下培养4~6d，待95%以上蚕体被感染僵化后收集整理感染僵化尚未发菌的蚕体，剔除因注射创伤引起杂菌感染、变黑软化或未感染僵化的蚕体；(4) 填埋基质准备：准备带盖透明塑料盒；选用草木灰，100℃以上高温灭菌8~10小时后再紫外灭菌3~4小时，置于带盖透明塑料盒中，草木灰厚4~6cm，作为模拟生态土层填埋基质用；(5) 覆土培育管理：将步骤（3）感染僵化尚未发菌的蚕体填埋于装有草木灰填埋基质的带盖透明塑料盒中，仅蚕头胸部3～5mm露出，每天打开盒盖喷洒无菌水，放置在温度15℃~22℃、相对湿度60%~70%的黑暗环境下培养3~7天；再转入光强为250~300lx，温度为白天21~24℃、夜晚16~18℃,相对湿度70~75%的条件下培养4‑6天；再转入光强为50~500lx，温度为14℃~25℃,相对湿度60%~80%的条件下培养35~45天；子实体生长成熟后，将蚕体从草木灰填埋基质中取出，清理干净周围粘覆的草木灰，即获得成熟蚕虫草。