[发明专利]利用DART-MS法快速测定尿液中3-羟基-3-甲基戊二酸的方法

摘要

本发明提供了一种利用DART‑MS法快速测定尿液中3‑羟基‑3‑甲基戊二酸含量的方法，本发明测定方法无需冗长的色谱分离，分析速度为秒级，能够有效的节省实验时间，具有简单、快速、高效的特点，该检测技术可以推广到尿液中小分子有机酸的测定领域，实际应用价值高，意义深远。

主权项

一种利用DART‑MS法快速测定尿液中3‑羟基‑3‑甲基戊二酸含量的方法，其特征在于，所述方法为：(1)绘制标准曲线称取3‑羟基‑3‑甲基戊二酸标准品，用超纯水配制成浓度范围在0.05～5mg/L梯度浓度的标准溶液，将所得标准溶液进行前处理，之后进样进行DART‑MS法测定，得到标准溶液质谱图，以3‑羟基‑3甲基戊二酸m/z 161的特征峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，进而计算得到标准曲线方程；所述标准溶液的前处理方法为：将所述标准溶液与乙腈等体积混匀，离心，弃去沉淀，用浓盐酸调节pH至1.0，加入乙酸乙酯，所述乙酸乙酯的用量为标准溶液体积的3倍，混匀，离心，取上清液，残余物质重复进行加入乙酸乙酯混匀、离心、取上清液的操作步骤，重复两次，合并每次所得上清液，氮吹吹干，用体积比1：1的甲醇/水溶液复溶，所述甲醇/水溶液的用量为标准溶液体积的5％，即完成前处理；所述DART‑MS法的测定条件为：DART条件：负离子模式采集数据，气体温度为400℃，采用Dip‑it进样方式进样，载样器滑动速度为0.5mm/s，离子化气体为高纯氦气，待机气体为高纯氮气；MS条件：扫描方式为Full Scan，扫描范围m/z 50‑200，sim模式下m/z 161，锥孔电压为15V；进样采用25μL进样针，进样量2μL；(2)试样检测取尿液试样，进行前处理，之后在步骤(1)DART‑MS法的测定条件下，测得试样质谱图，将试样质谱图中3‑羟基‑3甲基戊二酸m/z 161的特征峰面积代入步骤(1)得到的标准曲线方程中，计算得出尿液试样中3‑羟基‑3‑甲基戊二酸的含量；所述尿液试样的前处理方法为：将尿液试样用超纯水稀释至原体积的20倍，得到稀释液，将所得稀释液与与乙腈等体积混匀，离心，弃去沉淀，用浓盐酸调节pH至1.0，加入乙酸乙酯，所述乙酸乙酯的用量为稀释液体积的3倍，混匀，离心，取上清液，残余物质重复进行加入乙酸乙酯混匀、离心、取上清液的操作步骤，重复两次，合并每次所得上清液，氮吹吹干，用体积比1：1的甲醇/水溶液复溶，所述甲醇/水溶液的用量为稀释液体积的5％，即完成前处理。