[发明专利]一种基于iTRAQ联合LC、MALDI的差异蛋白组学在审
| 申请号： | 201711184801.8 | 申请日： | 2017-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN107860852A | 公开（公告）日： | 2018-03-30 |
| 发明（设计）人： | 于思创;王海云 | 申请（专利权）人： | 南宁科城汇信息科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/88 |
| 代理公司： | 南宁指北针知识产权代理事务所(特殊普通合伙)45120 | 代理人： | 于勤,林培 |
| 地址： | 530022 广西壮族自治区南*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于iTRAQ联合LC、MALDI的差异蛋白组学，①将4个样品分别酶解做成4个标记，将前四者混合、色谱、质谱、数据分析②将S1、S2、S3、S4、S5、S6、S7、S8通过ParallelDenature和Digest分别得到113‑192PRG、114‑191 PRG、115‑190 PRG、116‑189 PRG、117‑188 PRG、118‑187 PRG、119‑186 PRG、121‑184 PRG，后将前者通过Mix/MS、MS/MS分别得到113‑121。本发明采用临床样本对其进行定位定量的表达验证，寻找其与临床相关性的证据，评价临床价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 itraq 联合 lc maldi 差异 蛋白组 | ||
【主权项】：
一种基于iTRAQ联合LC、MALDI的差异蛋白组学，其特征在于：由以下步骤组成：提取正常组和肝癌组大鼠肝脏总蛋白液，将两组分别混合，采用丙酮沉淀法将蛋白质沉淀后定量，使每组约含100ug总蛋白，依次进行胰酶酶解、还原烷基化、iTRAQ 标记等，过程严格遵照iTRAQ试剂盒说明书进行；将iTRAQ标记后的正常组和肝癌组大鼠肝脏酶解产物等量混合，进行一维SCX和二维nano‑LC色谱分离后，进入质谱仪分析；具体如下：①将样品1 、 样品2 、样品3 、样品4分别酶解做成114标记、 115标记、 116标记、 117标记，将前四者混合 、色谱、 质谱 、数据分析；②将S1、 S2 、 S3 、 S4 、 S5 、S6 、S7、 S8通过Parallel Denature ＆ Digest分别得到113‑192PRG、 114‑191 PRG 、 115‑190 PRG、116‑189 PRG、117‑188 PRG、118‑187 PRG、119‑186 PRG、121‑184 PRG ，后将前者通过 Mix/MS、MS/MS分别得到113、 114 、 115、116、117、118、119、121。
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