[发明专利]一种石斛多倍体成苗诱导方法

摘要

本发明公开了一种石斛多倍体成苗诱导方法，涉及石斛多倍体技术领域。本发明石斛多倍体成苗诱导方法，包括以下步骤(1)选取霍山石斛品种；(2)将二倍体霍山石斛栽培管理，直至蒴果形成；(3)剪下蒴果，沿蒴果纵轴切开，将二倍体石斛种植接种在1/2MS液体培养基中，间歇振荡后萌发培养得到二倍体植株；(4)将四倍体愈伤组织进行诱导分化；(5)将二倍体植株与四倍体植株人工授粉杂交、结果；(6)将三倍体霍山石斛种子进行播种，待长出幼苗后，置自然光下炼苗。本发明与现有的方法相比，茎、叶、花明显增大，产量与糖含量明显提高，抗逆性增强，具有多倍体和杂交种的双重优势。

主权项

一种石斛多倍体成苗诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取抗逆性好、生长快、茎杆粗、纤维含量低、药效成分含量高的霍山石斛品种作为多倍体培育的二倍体霍山石斛；(2)将二倍体霍山石斛按照常规方法进行栽培管理，在开花后的5～10天内进行同株异花授粉，授粉后的霍山石斛植株，放置通风、半透光条件下，保持湿度30～50％、温度22～28℃，直至蒴果形成；(3)剪下蒴果，在无菌工作台内用85％酒精消毒3～5min，再使用0.1～0.3wt％的升汞水溶液消毒5～10min，无菌蒸馏水冲洗3～5遍，沿蒴果纵轴切开，将二倍体石斛种植接种在1/2MS液体培养基中，间歇振荡后萌发培养30～50天得到二倍体植株；(4)将四倍体愈伤组织进行诱导分化，获得四倍体植株幼苗；常规炼苗驯化栽培至开花得到四倍体植株；(5)将二倍体植株与四倍体植株人工授粉杂交、结果，且互为父本和母本，即得到三倍体霍山石斛种子；(6)将三倍体霍山石斛种子进行播种，待长出幼苗后，置自然光下炼苗5～10天，然后放置在20～30℃、75～85％的湿度下培养，得到三倍体霍山石斛成苗。