[发明专利]一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法

摘要

本发明属于纳米材料、电化学分析和生物传感器交叉技术领域，具体涉及一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法；采用Hummers法制备氧化石墨烯，将氧化石墨烯与耐尔兰滴涂到玻碳电极表面，采用一步共还原法在电极表面电化学还原沉积金纳米粒和生成还原氧化石墨烯；然后在金纳米粒上连接适体DNA，该适体DNA与多巴胺特异性结合，引起多巴胺和耐尔兰在电极表面有规律的电化学信号响应；拟合多巴胺和耐尔兰电流峰强度比率与多巴胺摩尔浓度之间的线性关系，构建比率电化学多巴胺适体传感器；该传感器制备工艺简单，制备成本低，产品灵敏度高，能够发展成为一种新颖的比率电化学适体传感器，适用于生物样品中多巴胺的高效检测。

主权项

1.一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于具体工艺包括以下步骤：(1)氧化石墨烯制备：将1.0克石墨加入三口瓶中，滴加25毫升质量浓度98％的浓硫酸碳化石墨，缓慢搅拌24小时，再加入1.5克高锰酸钾，将三口瓶转至冰浴中冷却，继续搅拌30分钟，升温至60℃，搅拌反应45分钟，每间隔15分钟加入3毫升蒸馏水，反应完毕后加入180毫升蒸馏水以终止反应，产物冷却至室温，经过滤、蒸馏水洗涤、干燥沉淀物，得到氧化石墨烯；(2)氧化石墨烯‑耐尔蓝 修饰的玻碳电极制备：在超声作用下将氧化石墨烯分散在蒸馏水中，然后加入质量浓度为1克/升的耐尔蓝 形成混合溶液，在室温下将混合溶液滴涂在新抛光的玻碳电极表面，制备出氧化石墨烯‑耐尔蓝 修饰的玻碳电极；(3)金纳米颗粒/还原氧化石墨烯‑耐尔蓝纳米复合物制备：将修饰的玻碳电极插入以质量浓度为1克/升的氯金酸为电解质的磷酸盐电解液中，在一定的电压下扫描一段时间，以便在玻碳电极表面电沉积生成金纳米颗粒，同时氧化石墨烯被电还原成为还原氧化石墨烯；(4)适体‑金纳米颗粒/还原氧化石墨烯‑耐尔蓝纳米复合物的制备：通过Au‑S键将终端修饰巯基的多巴胺适体DNA单链与金纳米颗粒结合，在玻碳电极表面制备多巴胺适体‑金纳米颗粒/还原氧化石墨烯‑耐尔蓝纳米复合物，再加入巯基己醇占据剩余的金纳米颗粒表面活性位点；(5)多巴胺传感器制备：加入不同浓度的多巴胺，使多巴胺与适体特异性结合，在玻碳电极表面形成卷曲缠绕的适体‑多巴胺复合物，从而阻碍了耐尔蓝 电信号在电极表面传输，随着多巴胺浓度增大，多巴胺电流峰强度I_DA增大，而耐尔蓝 电流峰强度I_NB随之减小，构建比率电流峰强度I_DA/I_NB与多巴胺摩尔浓度之间的线性关系，发展比率电化学多巴胺适体传感器；实现适体传感器的制备，该适体传感器适用于生物流体样品中多巴胺摩尔浓度的高效检测。