[发明专利]一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法

权利要求书

1.一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于具体工艺包括以下步骤：

(1)氧化石墨烯制备：将1.0克石墨加入三口瓶中，滴加25毫升质量浓度98％的浓硫酸碳化石墨，缓慢搅拌24小时，再加入1.5克高锰酸钾，将三口瓶转至冰浴中冷却，继续搅拌30分钟，升温至60℃，搅拌反应45分钟，每间隔15分钟加入3毫升蒸馏水，反应完毕后加入180毫升蒸馏水以终止反应，产物冷却至室温，经过滤、蒸馏水洗涤、干燥沉淀物，得到氧化石墨烯；

(2)氧化石墨烯-耐尔兰修饰的玻碳电极制备：在超声作用下将氧化石墨烯分散在蒸馏水中，然后加入质量浓度为1克/升的耐尔兰形成混合溶液，在室温下将混合溶液滴涂在新抛光的玻碳电极表面，制备出氧化石墨烯-耐尔兰修饰的玻碳电极；

(3)还原氧化石墨烯/金纳米颗粒复合物制备：将修饰的玻碳电极插入以质量浓度为1克/升的氯金酸为电解质的磷酸盐电解液中，在一定的电压下扫描一段时间，以便在玻碳电极表面电沉积生成金纳米颗粒，同时氧化石墨烯被电还原成为还原氧化石墨烯；

(4)适体-金纳米颗粒/还原氧化石墨烯-耐尔蓝纳米复合物的制备：通过Au-S键(金硫键)将终端修饰巯基的DNA单链(即多巴胺适体)与金纳米颗粒结合，在玻碳电极表面制备多巴胺适体-金纳米颗粒/还原氧化石墨烯-耐尔蓝纳米复合物，再加入巯基己醇占据剩余的金纳米颗粒表面活性位点；

(5)多巴胺传感器制备：加入不同浓度的多巴胺，使多巴胺与适体特异性结合，在玻碳电极表面形成卷曲缠绕的适体-多巴胺复合物，从而阻碍了耐尔兰电信号在电极表面传输，随着多巴胺浓度增大，多巴胺电流峰强度I_DA增大，而耐尔兰电流峰强度I_NB随之减小，构建比率电流峰强度I_DA/I_NB与多巴胺摩尔浓度之间的线性关系，发展比率电化学多巴胺适体传感器；实现适体传感器的制备，该适体传感器适用于生物流体样品中多巴胺摩尔浓度的高效检测。

2.根据权利要求1所述的一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的氧化石墨烯的质量纯度为90～95％。

3.根据权利要求1所述的一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的氧化石墨烯与耐尔兰的质量浓度比为1:5～5:1。

4.根据权利要求1所述的一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的扫描电压为-2.0V～-0.1V，扫描时间10～180秒。

5.根据权利要求1所述的一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的多巴胺适体摩尔浓度为1～50微摩/升，巯基己醇摩尔浓度为1～20微摩/升。

6.根据权利要求1所述的一种比率电化学多巴胺适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的多巴胺浓度为1纳摩/升至1毫摩/升，对多巴胺摩尔浓度的检测极限可达0.1～1纳摩/升。