[发明专利]一种用于检测目的基因低频突变的引物及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于检测目的基因低频突变的引物及试剂盒。本发明提供了用于检测待测样本目的基因待检区域的突变情况成套引物，包括Barcode引物F1、上游引物F2、下游外引物R1、下游内引物R2。本发明设计的成套引物用于建库，除能检测组织样本外，还能够快速、简便、灵敏、特异的对血液、尿液以及脑脊液等样本中游离DNA的不同区域进行靶向扩增，并高效检测低至0.1％水平的突变，大大的简化实验操作，有效避免文库损失及污染，显著降低成本，提高效率。

主权项

用于检测待测样本目的基因待检区域的突变情况成套引物，包括Barcode引物F1、上游引物F2、下游外引物R1、下游内引物R2；所述Barcode引物F1依次由测序接头1、用于区分不同样本的barcode序列和通用序列1组成；所述上游引物F2依次由通用序列1、分子标签、特定碱基序列和上游特异性引物序列组成；所述下游外引物R1依次由测序接头2和通用序列2组成；所述下游内引物R2依次由通用序列2和下游特异性引物序列组成；所述测序接头1和所述测序接头2为根据不同测序平台选择对应的测序接头；所述barcode序列均为长度为8‑12nt、无连续碱基，且GC含量为40‑60％的核苷酸；所述通用序列1和所述通用序列2的长度均为16‑25nt，且无连续碱基，GC含量为35‑65％，无明显二级结构；所述特定碱基序列为GAT；所述上游特异性引物序列和所述下游特异性引物序列是扩增所述目的基因待检区域的引物；所述分子标签为10‑12位随机碱基。