[发明专利]一种白芷组培体系的建立方法

摘要

本发明公开了一种白芷组培体系的建立方法，白芷属多年生高大草本，高1~2米。根圆柱形或圆锥形，有分枝，表面黄褐色。茎中空，有纵长沟纹，基部粗大，无毛，通常紫色。叶互生，呈羽状分裂，先端尖急，边缘有不规则的锯齿。7~8月开花，8~9月结果，果实长圆形或卵圆形。根可入药，夏、秋间采挖，晒干备用。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导、增殖、生根以及炼苗移栽等步骤成功地获得白芷组织培养再生植株,建立系统的白芷组织培养植株再生体系。白芷在国内市场供应缺口大，建立白芷无性繁殖体系，对促进白芷繁衍生息，合理利用白芷资源，将产生良好的生态效益、经济效益和市场效益。

主权项

一种白芷组培体系的建立方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体消毒：采集回来的白芷茎段以淸水冲洗9min后并用毛刷轻轻刷去上面的杂质,在超净工作台中用70%%乙醇溶液中消毒29s，后用无菌水洗2次，再用4%安替富民溶液漂洗4min，用无菌水冲洗3次后用无菌滤纸吸去水分后备用;（2）诱导培养：将步骤（1）消毒好的白芷茎段按成对芽为一个单位切成约1.4cm长的茎段，剪去茎段底部处理过程中褐化部分，接种到诱导培养基中进行芽诱导培养,接种后先在24℃条件下全暗培养2天，然后置于每天光照9小时，光照强度为1900lx，置于培养温度为24℃的条件下培养直至形成不定芽;（3）增殖培养：将步骤（2）培养得到的芽苗，从基部切取芽并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在24℃条件下全暗培养1天，然后置于每天光照10小时，光照强度为1900lx，置于培养温度为24℃的条件下培养，29天继代一次;（4）生根培养：将步骤（2）或（3）的芽苗长至1.4cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在24℃条件下全暗培养1天，然后置于每天光照13小时，光照强度为2900lx，培养温度为24℃的条件下培养至生根;（5）炼苗移栽：将长至2cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗4天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:蛭石＝1：2混合成的基质中于每天光照9小时，光照强度为2900lx，培养温度为24℃，空气湿度为80%的培养箱中培养4天，然后移栽定植于大田中。