[发明专利]一种培养具有单位高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌的方法

摘要

本发明公开了一种培养具有单位高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌的方法，具体步骤如下配制A液体培养基和B液体培养基；向A液体培养基中加入琼脂粉混合均匀后，用巴氏生孢八叠球菌母液在A培养基固体平板上划线；然后挑单菌落，放置于装有A液体培养基的试管中培养；取振荡培养后的菌液，接种于装有B液体培养基的锥形瓶中，扩大培养，即可获得高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌液。本发明采用的是A和B顺序的双培养基培养巴氏生孢八叠球菌，在单菌落培养和菌种复活阶段采用A培养基，在菌种扩大培养阶段采用B培养基。试验结果证明该方法下巴氏生孢八叠球菌单位脲酶活性有巨大提升，且其操作简单、结果稳定，重复率高。

主权项

一种培养具有单位高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌的方法，其特征在于：具体步骤如下：（1）配制A液体培养基和B液体培养基：A液体培养基包括蛋白胨1‑5 g/L、柠檬酸锂1‑5 g/L、牛肉膏2‑5 g/L、尿素10‑20 g/L、氯化镍0.02‑0.05 g/L，pH值为7‑9；B液体培养基包括甘露醇10‑20 g/L、大豆蛋白胨20‑30 g/L、氯化铵10‑15 g/L、氯化镍0.02‑0.05 g/L，pH值为7‑9；（2）向A液体培养基中加入琼脂粉混合均匀后，倒平板直至凝固为固体状态，用巴氏生孢八叠球菌母液在A培养基固体平板上划线，恒温培养12‑16小时；然后从划线固体平板上挑单菌落，放置于装有A液体培养基的试管中，在有氧条件下培养12‑16小时，恒温27℃‑37℃；（3）取步骤（2）振荡培养后的菌液，按照1%‑5%的接种量接种于装有B液体培养基的锥形瓶中，在有氧条件下扩大培养15小时以上，恒温27℃‑37℃，即可获得高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌液。