[发明专利]一种培养具有高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌的方法在审
申请号: | 201710961907.8 | 申请日: | 2017-10-17 |
公开(公告)号: | CN107723259A | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 赵阳;程留全;吕杰;刘娉慧;黄志全;张婧;范存彬 | 申请(专利权)人: | 华北水利水电大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 郑州中原专利事务所有限公司41109 | 代理人: | 王晓丽 |
地址: | 450045 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种培养具有高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌的方法,具体步骤如下配制A液体培养基和B液体培养基;向A液体培养基中加入琼脂粉混合均匀后,用巴氏生孢八叠球菌母液在A培养基固体平板上划线培养;然后挑单菌落培养;取振荡培养后的菌液,接种于装有B液体培养基的锥形瓶中,扩大培养,即可获得高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌液。本发明采用的是A和B顺序的双培养基培养巴氏生孢八叠球菌,在单菌落培养和菌种复活阶段采用A培养基,在菌种扩大培养阶段采用B培养基。结果证明该方法下巴氏生孢八叠球菌脲酶活性有巨大提升,且其操作简单、结果稳定,重复率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 培养 具有 脲酶 活性 巴氏生孢八叠 球菌 方法 | ||
【主权项】:
一种培养具有高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌的方法,其特征在于:具体步骤如下:(1)配制A液体培养基和B液体培养基:A液体培养基包括柠檬酸钠2‑5 g/L、蛋白胨2‑5 g/L、牛肉膏2‑5 g/L、尿素15‑20 g/L、氯化镍0.02‑0.05 g/L,pH值为7‑9;B液体培养基包括酵母提取物20‑30 g/L、氯化铵10‑15 g/L、氯化镍0.02‑0.05 g/L,pH值为7‑9;(2)向A液体培养基中加入琼脂粉混合均匀后,倒平板直至凝固为固体状态,用巴氏生孢八叠球菌母液在A培养基固体平板上划线,恒温培养12‑16小时;然后从划线固体平板上挑单菌落,放置于装有A液体培养基的试管中,在有氧条件下培养12‑16小时,恒温27℃‑37℃;(3)取步骤(2)振荡培养后的菌液,按照1%‑5%的接种量接种于装有B液体培养基的锥形瓶中,在有氧条件下扩大培养15小时以上,恒温27℃‑37℃,即可获得高脲酶活性的巴氏生孢八叠球菌液。
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