[发明专利]一种类似嵌合抗原受体修饰的CIK及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201710950969.9 | 申请日： | 2017-10-13 |
| 公开（公告）号： | CN107619821B | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 占顺利;高磊;袁绍鹏 | 申请（专利权）人： | 北京舜雷科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/62;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅;张立娜 |
| 地址： | 100036 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种类似嵌合抗原受体修饰的CIK及其制备方法与应用。本发明制备类似嵌合抗原受体修饰的CIK细胞制剂的方法包括：向CIK中转入能敲低内源性PD‑1表达，且能表达PD1胞外区‑CD28‑41BB‑CD3融合蛋白的重组载体，培养后收获细胞，从而制得所述CIK细胞制剂；所述重组载体上含有多个串联的靶向PD‑1mRNA的5’‑UTR、3’‑UTR和/或胞内区的miRNA的编码基因。实验证明，该载体可大大降低CIK细胞中内源PD‑1的表达，而表达的PD1胞外区‑CD28‑41BB‑CD3融合蛋白在与肿瘤细胞表面的PD‑L1/L2结合之后激活CIK细胞，从而显著提高CIK细胞的肿瘤杀伤活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 类似 嵌合 抗原 受体 修饰 cik 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种制备类似嵌合抗原受体修饰的CIK细胞制剂的方法，包括如下步骤：向 CIK中转入重组载体，所述重组载体能敲低内源性PD-1表达，并且能表达PD1胞外区-CD28-41BB-CD3融合蛋白，培养后收获细胞，从而制得所述类似嵌合抗原受体修饰的CIK细胞制剂；/n所述PD1胞外区-CD28-41BB-CD3融合蛋白自N端到C端依次由PD-1的胞外区、CD28的跨膜区和胞内区、4-1BB的胞内区和CD3的胞内区组成；/n所述重组载体为慢病毒载体；/n所述重组载体上含有5个串联的靶向PD-1 mRNA的5’-UTR、3’-UTR和/或胞内区的miRNA的编码基因；所述5个串联的靶向PD-1 mRNA的5’-UTR、3’-UTR和/或胞内区的miRNA的编码基因分别如下：/n（1）miRNA-PD1-716：核苷酸序列如序列表中序列1的第6396-6454位或序列2的第5641-5699所示；/n（2）miRNA-PD1-801：核苷酸序列如序列表中序列1的第6534-6592位或序列2的第5779-5837所示；/n（3）miRNA-PD1-808：核苷酸序列如序列表中序列1的第6672-6730位或序列2的第5917-5975所示；/n（4）miRNA-PD1-904：核苷酸序列如序列表中序列1的第6810-6868位或序列2的第6055-6113所示；/n（5）miRNA-PD1-988：核苷酸序列如序列表中序列1的第6948-7006位或序列2的第6193-6251所示；/n所述重组载体的序列为序列表中序列1或序列2所示。/n
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