[发明专利]促进基因编辑T细胞活化及扩增的生物膜、制法及应用在审
| 申请号： | 201710939240.1 | 申请日： | 2017-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN107794269A | 公开（公告）日： | 2018-03-13 |
| 发明（设计）人： | 邓涛;喻堃;徐国锋;卢铀 | 申请（专利权）人： | 成都美杰赛尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N5/10;C12N5/0783;C07K14/705 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙)51238 | 代理人： | 黎祖琴 |
| 地址： | 610000 四川省成都市高新区*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明提供一种促进基因编辑T细胞活化及扩增的重组生物膜制备方法，该重组生物膜通过如下步骤制备1)将修饰的CD137L基因序列通过基因重组方法导入到K562细胞基因组上，获得在K562细胞表面稳定表达修饰CD137L蛋白的稳转株细胞，命名为rCD137L‑K562细胞；2)对步骤1)所述的rCD137L‑K562细胞进行常规培养，通过细胞裂解液将细胞破碎，然后通过差速离心法获得含有修饰CD137L蛋白的生物膜，再使用亲和层析或亲和磁珠分离的方法将含有修饰CD137L蛋白的生物膜片段进行富集提取、纯化。本发明提高对基因编辑T细胞的刺激作用，且无任何不良副作用。 | ||
| 搜索关键词： | 促进 基因 编辑 细胞 活化 扩增 生物膜 制法 应用 | ||
【主权项】：
一种促进基因编辑T细胞活化及扩增的重组生物膜制备方法，其特征在于，该重组生物膜通过如下步骤制备：1)将修饰的CD137L基因序列通过基因重组方法导入到K562细胞基因组上，获得在K562细胞表面稳定表达修饰CD137L蛋白的的稳转株细胞，命名为rCD137L‑K562细胞；2)对步骤1)所述的rCD137L‑K562细胞进行常规培养，通过细胞裂解液将细胞破碎，然后通过差速离心法获得含有修饰CD137L蛋白的生物膜，再使用亲和层析或亲和磁珠分离的方法将含有修饰CD137L蛋白的生物膜片段进行富集提取、纯化；所述修饰的CD137L基因为NM_003811中第39位至第803位基因表示的CD137L的全基因序列和在CD137L基因终止密码子(第801位至第803位)前加入蛋白标签序列后所得的基因。
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