[发明专利]一种改善高糖高脂环境下骨骼肌萎缩的CD29+

摘要

本发明公开了一种改善高糖高脂环境下骨骼肌萎缩的CD29+人脐带源间充质干细胞培养方法，步骤如下：将抗人CD29抗体与多聚赖氨酸混匀，平铺于培养皿；用PBS溶液将脐带洗涤至无血迹变白；将组织剪成小段纵向剖开，去除血管和脐带外皮后将华尔通胶剪成小片；将小片脐带组织剪碎成泥状后加入0.25%的胶原酶IV,消化，加入10%胎牛血清的ɑ‑MEM培养液混匀，离心，将下部沉淀细胞加入适量10%胎牛血清的ɑ‑MEM培养液种入上述培养皿中，于5%CO2培养箱内倒置培养；弃上清，添加适量10%胎牛血清的ɑ‑MEM培养液，每隔3天换一次液，待融合率达85%以上，进行传代培养。本发明为后续研究和研制治疗高糖高脂环境下骨骼肌萎缩的药物奠定了理论基础和试验依据，具有广阔的应用前景。

主权项

一种改善高糖高脂环境下骨骼肌萎缩的CD29+人脐带源间充质干细胞培养方法，其特征在于：包括以下步骤:a.将抗人CD29抗体与多聚赖氨酸混匀，平铺于培养皿；b．用PBS溶液将脐带洗涤至无血迹变白；c.将组织剪成小段，纵向剖开，去除血管和脐带外皮后将华尔通胶剪成小片；d．将小片脐带组织剪碎成泥状后加入0.25%的胶原酶IV, 37℃消化2‑3小时，加入适量10%胎牛血清的ɑ‑MEM培养液混匀，离心，将下部沉淀细胞加入适量10%胎牛血清的ɑ‑MEM培养液种入上述培养皿中，于5% CO2培养箱内倒置培养；e．弃掉上清液，添加适量10%胎牛血清的ɑ‑MEM培养液，每隔3天换一次液，待融合率达85%以上，进行传代培养。