[发明专利]一种基于腺病毒AdC6的表达载体及其构建方法在审

专利信息
申请号: 201710814259.3 申请日: 2017-09-11
公开(公告)号: CN107686843A 公开(公告)日: 2018-02-13
发明(设计)人: 李婷婷;罗升学;王文敬;黎诚耀 申请(专利权)人: 南方医科大学
主分类号: C12N15/66 分类号: C12N15/66;C12N15/861
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司44102 代理人: 邓义华,廖苑滨
地址: 510515 广东省广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种制备腺病毒表达载体的方法,所述方法包括以野生型腺病毒AdC6基因组为基础,通过基因组直接克隆方法,删除E1编码区和E3编码区,在E1删除区插入I‑Ceu I和PI‑Sce I酶切位点,获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体。本发明通过in‑fusion连接的方法,构建大片段质粒,不受限制性酶切位点的限制,可以用于任何大片段载体的构建;本发明通过几次连接可以构建完成腺病毒表达载体,步骤简单;本发明删除E1和E3区,通过PCR扩增DNA片段的过程中就能够完成删除;本发明在细菌水平筛选阳性克隆更加容易、快捷,而且缩短了腺病毒载体构建时间。
搜索关键词: 一种 基于 病毒 adc6 表达 载体 及其 构建 方法
【主权项】:
一种制备腺病毒表达载体的方法,其特征在于,所述方法包括:以野生型腺病毒AdC6基因组为基础,通过基因组直接克隆方法,删除E1和E3的编码区,在E1删除区插入I‑Ceu I和PI‑Sce I酶切位点,获得复制缺陷性腺病毒载体。
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