[发明专利]一种人源铜锌超氧化物歧化酶的制备方法在审
申请号: | 201710756221.5 | 申请日: | 2017-08-29 |
公开(公告)号: | CN107779464A | 公开(公告)日: | 2018-03-09 |
发明(设计)人: | 朱斌辉;朱艳娟;许仁杰;韩蓉 | 申请(专利权)人: | 苏州东泉生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/62;C12N9/02 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司32200 | 代理人: | 孙昱 |
地址: | 215126 江苏省苏州市苏州工业*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种人源铜锌超氧化物歧化酶的制备方法,将SEQ ID NO.2所示的序列插入原始载体,构建重组载体,扩大培养后提取表达产物,N‑His‑TEV‑hSOD1酶解,纯化得到无标签的hSOD1。本发明提供的方法,目的基因根据密码子偏爱性设计目的基因序列,并且在N末端添加His‑TEV标签,既避免了表达异源性,又避免了动物或人来源的安全性风险;方法中序列设计添加了His纯化标签和标签切除TEV识别位点,既有利于纯化,也便于切除His标签以达到药用蛋白的要求。本发明提供的方法表达菌株表达出的hSOD1为可溶性表达,并且添加Cu2+&Zn2+诱导时,表达量明显增加,满足规模化生产的要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 人源铜锌 超氧化物歧化酶 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种用于构建人源铜锌超氧化物歧化酶重组载体的核苷酸序列,其特征在于,该序列包括在人源铜锌超氧化物歧化酶N末端添加His‑TEV标签,该序列如SEQ ID NO.2所示。
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